在肺癌的病理诊断中，免疫组化技术起着至关重要的作用。然而，正确应用和解读这些技术结果仍然存在一些问题和挑战。本文将探讨肺癌不同组织学类型的免疫组化应用中的常见问题，并提供一些实用的建议。

首先，选择最佳的标记组合是至关重要的。在使用有限的组织样本（如穿刺）进行亚型鉴别时，TTF1 和 p40 是标准组合。然而，如果没有神经内分泌分化的形态学特征，进行神经内分泌标志的染色可能并不是必要的。值得注意的是，p40 在鉴别鳞状细胞癌方面优于 p63。

其次，正确解读 TTF1 和 p40 的阳性结果也非常重要。TTF1 的局灶性阳性可以被认为是肺腺癌的标记，而 p40 应在超过 50% 的肿瘤细胞核中为阳性。然而，需要注意的是，只有大约 75% 到 80% 的腺癌 TTF1 呈阳性，而具有粘液特征的腺癌往往 TTF1 呈阴性。同一细胞中的双阳性（TTF1 和 p40/p63）并不是腺鳞癌的标志。

此外，TTF1 克隆（SPT24、SP141 和 8G7G3/1）在肺腺癌中的染色性能因克隆而异。8G7G3/1 是鉴别肺腺癌特异性最强的抗体。需要注意的是，一定比例的鳞状细胞癌被 TTF1 标记（4-20%），特别是 SPT24 在鳞状细胞癌中的阳性频率更高。

在区分神经内分泌肿瘤与其他类型时，应用一组抗体：嗜铬粒蛋白 A、突触素和 CD56 是识别 NE 肿瘤的最佳组合。每种抗体的染色意义因样本类型、组织学亚型以及阳性反应的程度和/或强度而异。但5%-10% 的肿瘤可能对所有三个神经内分泌标志物均为阴性。CD56最敏感，但并不特异，因为该蛋白在神经元、神经胶质、造血细胞（自然杀伤细胞、γδ-T 细胞、活化的 CD8a 分子阳性 T 细胞和树突细胞）和骨骼肌上表达。

最后，正确使用增殖标志物 Ki-67 在肺癌的诊断中也非常重要。Ki-67 在区分类癌和高级别神经内分泌癌（大细胞神经内分泌癌和小细胞癌）中起着关键作用，特别是在小的或挤压变性的活检或细胞学样本中。然而，Ki-67 表达的标准评分方法尚未确定用于肺癌。