干细胞6问6答，一文读懂
1.什么是干细胞？
干细胞存在于胚胎组织以及成人或胎儿组织中，如骨髓、脂肪、牙髓、血液、、脐带等组织。干细胞是一类未分化的细胞，具有很强的自我更新、增殖和单向或多向分化的潜力。全能干细胞（单个受精卵）整 250 多种细胞类型[1]，如构成血液、大脑、肌肉、骨骼等其他类型的特殊细胞。
2.干细胞有哪些类型？
干细胞有2种主要类型：胚胎干细胞和成体干细胞。胚胎干细胞存在于胚胎中，可以变成体内任何类型的细胞，所以它们可用于修复受疾病影响的组织和器官。成体干细胞存在于婴儿、儿童和成人中。成体干细胞可在实验室中诱导，使它们的行为更像胚胎干细胞，这样的干细胞又被称为诱导多能干细胞[2]。
3.国内有哪些支持干细胞临床的指南？
《中国衰老与抗衰老专家共识（2019年）》提出“人体衰老与组织中的干细胞衰老密切相关[3]。通过
输注细胞或活性因子，有可能减轻衰老的危害，改善中老年健康，是一类科学抗衰老的策略。”
《干细胞在整形修复美容领域研究和临床试验的专家共识》[4]提出“在整形修复美容外科领域经过了多年的基础与临床研究证明其在促进皮肤再生与修复、组织血管化、软组织再生、骨与软骨修复、多组织年轻化及毛囊再生等多方面均有较好的治疗效果。”
此外，《间充质干细胞治疗新型冠状病毒肺炎专家共识》[5]提及“间充质干细胞（MSC）治疗新冠安全性良好，在缩短病程、减轻肺部损伤、降低炎症因子水平等方面显示出一定的临床疗效，有望为治疗重型、危重型新冠肺炎提供新的手段。”
4.干细胞疗法的原理是什么？
干细胞具有以下特性：广泛增殖的能力、通常来自单个细胞、可分化成不同类型细胞的能力，基于这些特性，将干细胞回输患者体内，干细胞能够替换受损的组织/器官[6]，从而达到治疗疾病的效果。
5.人体干细胞从哪里提取？
多项临床试验表明，干细胞可以从早期胚胎、脐带、骨髓、脂肪、牙髓等提取[1,7-9]。选择脂肪组织作为自体间充质干细胞（MSC）的来源，是因为与其他来源位点（如骨髓）相比，脂肪组织相对容易获取[9]。
6.提取后的干细胞会做什么处理？
北京大学邓宏魁研究组通过干细胞治疗1型糖尿病的案例中，从患者腹部皮下脂肪获取约 30mL 组织，用含 2% 青霉素 - 链霉素的 PBS 洗涤，用胶原酶 IV 溶液解离，加入培养基处理悬液后离心，去上清，重悬细胞接种于 6 孔板培养，后续换液、传代，长满后制备饲养层细胞并铺板。接着对这些细胞采用四步化学重编程方案，按阶段换培养基，解离细胞接种后挑选合适集落进行胰岛分化测试，筛选产量最高的进行下游生产及相关测试，通过后培养并传代，扩增后用特定试剂解离细胞，悬于含特定成分的冻存培养基，分装冻存。再将合适的细胞用特定试剂分散为单细胞接种，按阶段换分化培养基，阶段 3 后进行 3D 培养，转移接种，形成簇后再转移并进一步分化，分化完成后用特定试剂解离，悬于含特定成分的冻存培养基，分装冻存于特定仪器，长期储存或运输时放液氮[10]。
也有研究用类似的方法处理，用酶消化和离心将脂肪抽吸物分离成基质血管组分，然后在低氧条件下在含有10%胎牛血清 （FBS） 的标准生长培养基中进行细胞培养。培养细胞直至达到 80%汇合，并进一步培养直至第 2次传代（P2）。在P2完成后，将细胞洗涤3次以去除FBS，并使用经过验证的控制速率冷冻方法进行冷冻保存[9]。
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参考文献：
1.Tian Z, Yu T, Liu J, Wang T, Higuchi A. Introduction to stem cells. Prog Mol Biol Transl Sci. 2023;199:3-32. doi: 10.1016/bs.pmbts.2023.02.012. Epub 2023 Mar 15. PMID: 37678976.
2.What Is Stem Cell Research?
3.《中国衰老与抗衰老专家共识（2019年）》.
4.《干细胞在整形修复美容领域研究和临床试验的专家共识》.
5.《间充质干细胞治疗新型冠状病毒肺炎专家共识》.
6.Kolios G, Moodley Y. Introduction to stem cells and regenerative medicine. Respiration. 2013;85(1):3-10. doi: 10.1159/000345615. Epub 2012 Dec 13. PMID: 23257690.
7.Chahal J, Gómez-Aristizábal A, Shestopaloff K, Bhatt S, Chaboureau A, Fazio A, Chisholm J, Weston A, Chiovitti J, Keating A, Kapoor M, Ogilvie-Harris DJ, Syed KA, Gandhi R, Mahomed NN, Marshall KW, Sussman MS, Naraghi AM, Viswanathan S. Bone Marrow Mesenchymal Stromal Cell Treatment in Patients with Osteoarthritis Results in Overall Improvement in Pain and Symptoms and Reduces Synovial Inflammation. Stem Cells Transl Med. 2019 Aug;8(8):746-757. doi: 10.1002/sctm.18-0183. Epub 2019 Apr 9. PMID: 30964245; PMCID: PMC6646697.
8.Cheng L, Wang S, Peng C, Zou X, Yang C, Mei H, Li C, Su X, Xiao N, Ouyang Q, Zhang M, Wang Q, Luo Y, Shen M, Qin Q, Wang H, Zhu W, Lu G, Lin G, Kuang Y, Chen X. Human umbilical cord mesenchymal stem cells for psoriasis: a phase 1/2a, single-arm study. Signal Transduct Target Ther. 2022 Aug 5;7(1):263. doi: 10.1038/s41392-022-01059-y. PMID: 35927231; PMCID: PMC9352692.
9.Freitag J, Bates D, Wickham J, Shah K, Huguenin L, Tenen A, Paterson K, Boyd R. Adipose-derived mesenchymal stem cell therapy in the treatment of knee osteoarthritis: a randomized controlled trial. Regen Med. 2019 Mar;14(3):213-230. doi: 10.2217/rme-2018-0161. Epub 2019 Feb 14. PMID: 30762487.
10.da Cunha JM, da Costa-Neves A, Kerkis I, da Silva MC. Pluripotent stem cell transcription factors during human odontogenesis. Cell Tissue Res. 2013 Sep;353(3):435-41. doi: 10.1007/s00441-013-1658-y. Epub 2013 Jun 5. PMID: 23736381.
11.Transplantation of chemically induced pluripotent stem-cell-derived islets under abdominal anterior rectus sheath in a type 1 diabetes patient.
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