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如何应用基因检测手段检测白血病特异性融合基因呢?

如何应用基因检测手段检测白血病特异性融合基因呢?

近年来,白血病发病率逐年升高。尤其儿童白血病发病率日益增高。能诱发白血病,除了环境因素,还有遗传基因的原因。

 

能引起白血病的特异性融合基因有很多,主要介绍以几种:

 

(1)1(9;22)易位:t(9;22)易位常见于慢性粒细胞白血病(CML).CM中的BCR-ABL融合基因可应用传统的DNA杂交方法以断裂点出的序列合成探针,方CML作出基因诊断,其检测灵敏度为1%~5%.应用RT-PCR法检测BCR-ABL益合基因转录本,其灵敏度可达从107个细胞中检出一个白血病细胞,因而常用于微残存病(MRD)的检测。通常还采用嵌套式PCR来提高检出灵敏度。

 

 

(2)t(15;17)易位:t(15;17)易位使得15号染色体上的PML基因与17号染色体上的RARα基因发生融合。但是不同的患者PML断裂点不同。PML基因共有3个断裂点,分别形成长形(L)、短形(s)和L变异形3种PML-RARα异构体。应用嵌套式PCR检测PML-RARα转录本,可检测急性早幼粒细胞白血病的t(15;17)易位。


(3)t(8;21)易位:t(8;21)易位是AML-M2b型白血病特异的染色体异常,约90%的患者有这种易位。t(8;21)易位使得21号染色体上急性粒细胞白血病基因1(AML1)的5'端和8号染色体上ETO基因的3'端形成融合基因。以巢式RT-PCR万法很容易检测到白血病细胞内的AML1-ETO融合基团转录本。

 

 

(4)11q23异常:11q23异常常见于AML及ALL中,尤其是婴幼儿型白血病,可牵涉到(9;11)、t(4;11)及(11;19)3种最常见的染色体易位,其中 t(9:11)是AML-M5特异的染色体异常,产生的MLL-AF9融合基因可作为标志基因,与内发生易位的起码还有21条染色体条带,因而11g23易位非常复杂,所102裂点部位集中在一个8.3kb的Bam HI酶解片段内,且目前已有一条cDNA探针,结合用m廠解,用传统的DNA杂交法可对變大部分1023异常的血肿瘤作出基因诊断。

 

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