目前骨组织工程的构建多采用两种方法。
体外构建:把种子细胞和支架在体外培养液中培养使种子细胞增殖并爬满支架后植人体内,观察人工骨组织与自体骨的愈合情况。体外构建虽然具有一些在体内构建难以实现的优点,但是在传统的静态培养条件下不能建造出厚度>0.7cm 的骨组织。随着生物反应器和灌注培养系统的先后出现,改善了细胞、组织在体外培养的条件,有助于模拟体内环境,获得营养、排除代谢产物和物质交换,促进组织工程产品实现商品化。
体内构建:把种子细胞复合到支架上,将成骨细胞/支架复合物植入体内,种子细胞在体内增殖分化形成骨组织,修复骨缺损。目前,这两种方法均在实验室中取得了成功。也有采用种子细胞和生物因子一起复合到细胞支架上进行培养后植入体内,或者采用细胞因子的缓释系统使细胞因子持续地发挥作用。
Breitbart采用体外培养的骨膜细胞种植于 PCA 无纺网支架,移入体内,修复颅骨缺损,证明了组织工程化骨可用于修复骨缺损。韩亮用自体骨髓-珊瑚-rhBMP2 复合物植入兔体内后成功修复了兔下颌骨缺损;Liao利用纳米-羟基磷灰石/胶原/聚酸 nano-hydroxyapatite/collagen/polylactic acid(nHAC/PLA )复合或不复合(rhBMP-2 )后直接植入兔体内进行兔脊柱后外侧融合的实验结果显示,术后 6 周和 10 周材料的融合率和机械强度上与自体松质骨融合组相似,从标本的显微结构分析植入的 nHAC/PLA 和自体髂骨块相比无不良反应,术后 2 周即使无 rh-BMP-2 复合也有骨样组织形成。表明体外组装后植入体内具有与体外培养相似的效果。

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