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睢宁县人民医院专家

简介:

睢宁县人民医院建院于1949年,是睢宁地区第一家公立医疗机构。医院于1995年被评定为二级甲等综合性医院,于2011年被江苏省人民政府确定为江苏省县级公立医院改革试点单位,于2014年被国家卫计委确定为全面提升县级医院综合能力第一阶段县医院,在2019年被国家卫健委认定达到县级医院综合服务能力推荐标准,在2020年成功转设成为三级综合医院,2022年6月《徐州医科大学附属医院与睢宁县人民政府合作推进睢宁县人民医院高质量发展框架协议》签订,医院挂牌徐州医科大学附属医院睢宁分院。医院荣获"徐州市先进基层党组织"、"徐州市抗击新冠肺炎疫情先进集体"、"爱婴医院"、"人民满意医院"等称号,是徐州医科大学、南京医科大学康达学院、徐州卫生中等专业学校、宿迁卫生中等专业学校、皖南医药卫生高等职业学院教学医院。承担着睢宁及周边近150万人口的医疗保健任务。。

孟超 副主任医师

擅长呼吸科常见病、疑难病诊治,对肺部感染、肺结节及肺部肿瘤经验丰富。熟练操作支气管镜检查与介入治疗,肺结节和肺肿瘤的穿刺活检与微创治疗、胸腔积液及胸腔镜检治疗。对肺部肿瘤靶向治疗、免疫治疗及全程管理经验丰富。

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擅长:擅长呼吸科常见病、疑难病诊治,对肺部感染、肺结节及肺部肿瘤经验丰富。熟练操作支气管镜检查与介入治疗,肺结节和肺肿瘤的穿刺活检与微创治疗、胸腔积液及胸腔镜检治疗。对肺部肿瘤靶向治疗、免疫治疗及全程管理经验丰富。
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葛文君 副主任医师

心力衰竭,心电生理,冠脉

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戴陆春 副主任医师

擅长呼吸科常见病、疑难病诊治,.对肺部感染、肺结节及肺部肿瘤经验治疗、肺结节和肺肿瘤的穿刺活检与治疗。 对肺部肿瘤靶向治疗、免疫治疗及全程管理经验丰富。

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擅长:擅长呼吸科常见病、疑难病诊治,.对肺部感染、肺结节及肺部肿瘤经验治疗、肺结节和肺肿瘤的穿刺活检与治疗。 对肺部肿瘤靶向治疗、免疫治疗及全程管理经验丰富。
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陈成 副主任医师

擅长多种癌症治疗

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黄芳 主任医师

各类实体瘤如消化系统恶性肿瘤(食管癌、胃癌、大肠癌、肝癌、胰腺癌)及肺癌、乳癌、卵巢癌、恶性黑色素瘤的诊治。

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擅长:各类实体瘤如消化系统恶性肿瘤(食管癌、胃癌、大肠癌、肝癌、胰腺癌)及肺癌、乳癌、卵巢癌、恶性黑色素瘤的诊治。
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党志成 主任医师

恶性肿瘤综合治疗策略制定

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倪双虎 主治医师

擅长儿内科及新生儿科各种疾病的诊治,尤其是在小儿神经系统、呼吸、小儿消化等方面有独到的见解。

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擅长:擅长儿内科及新生儿科各种疾病的诊治,尤其是在小儿神经系统、呼吸、小儿消化等方面有独到的见解。
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陈齐 主治医师

擅长儿内科及新生儿科各种疾病的诊治,尤其是在小儿呼吸、小儿消化等方面有独到的见解。

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擅长:擅长儿内科及新生儿科各种疾病的诊治,尤其是在小儿呼吸、小儿消化等方面有独到的见解。
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陆倩 住院医师

儿科医生,硕士学历,三级医院在职医生,擅长儿科疾病,神经内科,癫痫。

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倪冬冬 住院医师

神经外科常见病,脑出血,脑肿瘤诊断与治疗

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擅长:神经外科常见病,脑出血,脑肿瘤诊断与治疗
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患友问诊

科普文章

#帕金森氏病#帕金森综合征#帕金森病性痴呆#帕金森痴呆
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继发性帕金森病一般是因为别的疾病而导致的帕金森病样表现,一般可根据患者具体病情,采用药物治疗、非药物治疗、病因治疗等方法进行合理治疗。

1. 药物治疗:对于继发性帕金森病通常采用多巴胺类药物进行治疗,如左旋多巴,可增加大脑中多巴胺水平,缓解帕金森病的主要症状。此外,也可谨遵医嘱,服用抗胆碱药物,可减少大脑中的胆碱水平,改善症状,如常见的东莨菪碱、苯海索等。

2. 非药物治疗:主要包括心理治疗和物理治疗,其中物理治疗可通过一系列的运动训练,改善患者肌肉僵硬和运动困难的症状。心理治疗则是通过心理咨询等方法,帮助患者调整心态,减轻帕金森病对心理健康的影响。

3. 对因治疗:对于有特定原因引起的帕金森病,需要针对这些病因进行治疗。如脑梗塞引起的血管性帕金森病,需要针对脑梗塞进行治疗,可在医生指导下,服用阿司匹林、氯吡格雷、西洛他唑等抗血小板聚集的药物进行治疗,可预防脑血栓的出现。其次也可给予阿托伐他汀、瑞舒伐他汀等降脂药物,控制患者体内的血脂水平,缓解病情。对于药物引起的药物性帕金森病,需停服相关药物或调整原有药物,从源头上根除引起帕金森病的原因。一旦出现继发性帕金森病,需要尽快到医院就诊,在医生指导下,根据患者的病情,选择合理的方法进行治疗。

#症状性帕金森#帕金森病性痴呆
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帕金森病的主要临床表现可以分为运动症状和非运动症状,以静止性震颤、运动迟缓、肌强直和姿势、步态异常等为运动症状,又称“运动四主征”。

帕金森病的非运动症状,包括:

  • 嗅觉减退
  • 睡眠障碍(入睡困难、睡眠破碎、早醒、多梦,白天睡眠增多和快速眼动睡眠行为障碍(rapid eye movement sleep behavior disorder,RBD))
  • 淡漠、焦虑和抑郁、易激怒、神经精神症状、认知功能减退、自主神经功能障碍(夜尿多、尿频、尿急、多汗、心慌)
  • 胃肠道症状(有流涎、吞咽功能失调、腹胀、胃肠蠕动慢,吸收功能差和便秘)和感觉异常等等。

非运动症状不能忽视,它可以伴随运动症状一起出现,也可以先出现,还可以在运动症状出现后再出现,并对帕金森病患者生活质量影响很大。

#震颤麻痹痴呆#帕金森病性痴呆
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视频简介

作者信息:首都医科大学附属北京朝阳医院 神经内科 副主任医师 张娟

帕金森病患者除了药物治疗和康复训练外,还要日常生活饮食方面的配合。

第一、饮食上要清淡,戒掉烟酒。日常吃的食物以容易消化、清淡的食物为主,要避免食用高脂、高胆固醇食物;

第二、注意维生素的补充。可以常吃一些含抗氧化营养素的食物或者补充一些维生素药物,这些对于预防疾病的发生以及延缓病程的进展,改善早期的一些症状,都是有一定的效果的。需要提醒的是:如果帕金森病患者在使用多巴胺药物进行治疗的话,就要避免服用维生素B6;

第三、日常饮水。可以常喝绿茶或者白开水,避免患者出现便秘的情况;

第四、帕金森病患者到了晚期一般还会伴随有咀嚼以及吞咽方面的问题,这时食物尽量以流质为主,流质食物除了要兼顾多样性以外,还要注意不能过稀。

  经常会有PD患者问起,除了药物治疗,还有没有其他办法治疗此病?锻炼身体真得有效吗?今天,我将就这个问题给予解答。
  作为一种神经退行性疾病,帕金森病的主要治疗目标是延缓疾病发展和提高患者生活质量,那么康复治疗在这其中就起到了重要作用。研究表明,加强体育运动及脑力活动是预防和治疗帕金森病的有效方法,可以有效延缓脑组织衰老。锻炼时,应选择变化较多、比较复杂的运动形式,对于延缓运动功能减退,将很有好处。
 对于帕金森患者,应尽早开展康复治疗。帕金森病患者多存在步态障碍、姿势平衡障碍、语言和(或)吞咽障碍等,可以根据不同的行动障碍进行相应的康复或运动训练。如健身操、太极拳、慢跑等运动;进行语言障碍训练、步态训练、姿势平衡训练等。因为康复治疗好处多多:可以减少药物应用,延长药物有效时间;改善运动功能;降低并发症发生率;提高生活自理能力,改善心理状态,提高生活质量;还可减轻照护负担及家庭经济负担。
运动训练主要包括如下内容:
1. 放松和呼吸锻炼  闭眼,深而缓慢地呼吸,放松全身肌肉。
2. 面部动作锻炼 帕金森病患者的特殊面容是“面具脸”,是由于面部肌肉僵硬,导致面部表情呆板,因此做一些面部动作的锻炼是必要的。具体做法为:尽量皱眉,然后用力展眉,反复数次;用力睁闭眼;对着镜子,让面部表现出微笑、大笑、露齿而笑、撅嘴、吹口哨、鼓腮等。
3. 头颈部锻炼  帕金森病患者的颈部往往呈前倾姿势,非常僵硬,如不注意颈部的运动和康复,容易加重姿势异常,表现为驼背日益严重。具体做法为:头部上下运动、左右摆动、左右转动及前后运动,循序渐进,动作缓慢轻柔。
4.躯干部锻炼:帕金森病患者也存在躯干(中轴)肌张力增高。具体为侧弯运动,转体运动,腹肌锻炼及腰背肌的锻炼。
5. 手部锻炼 患者的手往往呈一种奇特屈曲的姿势,掌指关节屈曲,导致手掌展开困难;而其它手指间的小关节伸直,又使手掌握拳困难。具体做法为反复练习手指分开和合并的动作,也可反复练习握拳和伸指的动作。
6.上肢及肩部锻炼 站立,两臂向上甩起,至头部上方时屈肘,双手搭肩,然后两臂伸直,往下甩,放在体侧。
7. 腰部锻炼  站立,双腿分开与肩同宽,左臂弯曲放在腰上,右臂高举慢慢向左弯曲,保持5秒,再换右侧。
8. 下肢锻炼  站立,背靠墙,原地高抬腿,连续踏步。
9. 步态及平衡锻炼  步行时双眼直视前方,起步足尖抬高,先足跟着地再足尖着地,跨步尽量慢而大双足分开,分别向左右、前后移动重心,并保持平衡。
10. 语言训练 患者常常因为语言障碍而变得越来越不愿意讲话,而越不讲话,又会导致语言功能更加退化,呈现恶性循环。因此,患者必须经常进行语言的功能训练。具体做法为:重复伸舌、反复张嘴闭嘴,朗读诗词、唱歌等。
        在运动训练时,有些注意事项需要帕友们重视。反复训练,长期坚持才能取得好的效果。肌力训练时因肢体震颤和强直,能量消耗多,容易疲劳;在训练中要经常间断休息,以防止发生过度疲劳、肌力下降。运动过程中涉及翻身、起坐、坐位平衡及起立、步行等训练时,要特别注意保护,以防跌倒。确保治疗环境安全。定期至您的医生那里评估治疗进展,以便及时调整治疗方案和训练程序。
        合理的运动训练能改善帕金森病患者的平衡性、灵活性及肌力,有效防止患者出现跌倒,帮助帕金森病患者控制或减轻症状,重建自信。广大的帕友们,你们都学会了吗?你们开始训练了吗?
#帕金森病性痴呆#早发型帕金森病#青年型帕金森病
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在帕金森病的六大类治疗药物中,左旋多巴复方制剂无疑是最基本、最重要又最有效的药物,性价比最高。但如果不当使用,将会带来明显副作用。为使广大帕友掌握左旋多巴复方制剂的正确使用方式,利用好手中的这件“武器”,我将就此药使用注意事项及技巧,向大家做详细介绍。
 1、用药原则及注意事项如下:
① 初始应从小剂量开始,缓慢递增,争取最小剂量能达到最满意的效果,避免副作用的发生。
②  不盲目加药,不擅自停药,以防撤药综合征发生,并应终生服
药。单药治疗效果不佳,可适当联合用药。
③  个体化治疗,用法用量个体差异大,需遵医嘱服药。
④  主要副作用为恶心、呕吐,低血压以及症状波动、异动症和精神
症状等。
⑤ 活动性消化道溃疡慎用,闭角型青光眼、精神病患者禁用。
2、服用左旋多巴的小细节:
①服药时间:因左旋多巴口服后,绝大部分在肠粘膜、肝和其他外周组织被多巴脱羧酶脱羧形成多巴胺,仅1%左右左旋多巴能进入中枢神经系统发挥疗效。因为进食后,影响其胃排空,导致在外周分解增多,药效不佳。所以建议可耐受情况下,空腹服用(即餐前1小时),如若不能耐受,便于餐后1.5小时服药。
 ②食物种类:因左旋多巴吸收受蛋白质影响较大,故在服药期间,尽量减少蛋白质的摄入。
如您在用药过程中,出现症状波动剂(剂末现象、疗效减退、开关现象)或出现异动症、冻结步态,考虑出现了左旋多巴复方制剂的副作用,应及时联系您的主治医生调整左旋多巴的剂量。
当出现药物疗效不佳或副作用较多时,可进行必要评估,行脑深部电刺激(DBS)治疗,也称脑起搏器治疗,但术后仍需使用左旋多巴。
#震颤麻痹痴呆#帕金森病性痴呆
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帕金森病(PD)是一种常见的中枢神经系统退行性疾病,其病因和危险因素尚不明确。目前的认为与年龄老化、环境毒素的接触和遗传易感性等综合因素有关。具体如下:

1.年龄老化帕金森病主要发生于中老年人,40岁以前发病少见,提示老龄与发病有关。但也仅有少数老年人患病,说明年龄老化只是本病的促发因素。
2.环境因素:帕金森病的患病率存在地区差异,不同地区,患病率不同,可能是因为人们居住的环境中存在一些有毒物质,损伤了大脑的神经元,从而导致帕金森综合征的发生。
3.家族遗传性:研究发现帕金森病似乎有家族聚集的倾向,有帕金森病患者的家族其亲属的发病率较正常人群高一些。迄今也发现许多基因易感性可能是帕金森病发病的易感因素。
4、抽烟:大量研究显示,吸烟与帕金森病呈负相关,即吸烟者患帕金森病的风险显著降低。但没有必要为了预防帕金森病而去吸烟,因为吸烟的其他危害相当大。大量研究显示,吸烟与帕金森病呈负相关,即吸烟者患帕金森病的风险显著降低。但没有必要为了预防帕金森病而去吸烟,因为吸烟的其他危害相当大。
5、农药:暴露于农药和其他化学污染的环境中会增加帕金森病风险,这一证据较为充分。
6、乳制品:帕金森病风险在牛奶和乳制品摄入量较高的个体中有所增加。最新的一项荟萃分析表明,乳制品摄入较高与帕金森病风险之间的关联在男性中更强。
7、甲基苯丙胺:其为新型毒品的一种,相关研究显示甲基苯丙胺可能增加帕金森病的患病风险。
8、癌症:有研究显示,黑色素瘤患者的帕金森病风险增加。由于吸烟者的帕金森病风险显著降低,因此帕金森病患者的吸烟相关癌症风险降低。
9、其他:抑郁患者发展为帕金森病的可能性较无抑郁的患者明显增加。糖尿病常常是PD的伴发疾病,糖尿病患者中得PD的比例要高于普通人。具体原因还有待进一步研究。
对于可控的危险因素,及时的进行规避和干预,将有利于降低帕金森病的患病风险。

冻卵,受到了越来越多的关注。但你对冻卵女性了解有多少?她们年龄多大?冻卵后她们又如何使用的?通过1篇荟萃分析我们来一起揭秘。

一、研究方法

研究人员按照系统综述和荟萃分析的首选报告项目(PRISMA)建议进行了系统综述。他们搜索了 PubMed、Scopus 和 Web of Science 从建库到 2021 年 1 月的文献,对发表日期没有限制。纳入的研究需为英文,且研究了计划性冻卵的使用者或潜在使用者的特征、最初信息来源以及卵子处置情况。提取的数据通过主题分析进行分析,纳入研究的方法学质量使用 QualSyst 标准进行评估。

二、研究结果

  1. 研究筛选情况
    • 最初检索到 1074 条记录,其中 29 项研究符合纳入标准,包括 12 项定性研究和 17 项定量研究。调查的回复率在 38% - 85% 之间。
  2. 女性特征
    • 计划性冻卵的使用者或潜在使用者大多为单身、受过高等教育、有工作,平均年龄为 37 岁。
  3. 信息来源
    • 媒体和朋友是计划性冻卵最初知识的最常见来源,而健康专业人员则是较不常见的来源。
  4. 卵子使用情况
    • 大多数计划性冻卵者没有尝试使用冷冻卵子怀孕,但她们并不后悔进行了该过程。

三、讨论与启示

  1. 人口特征与卵子使用
    • 计划性冻卵的大多数使用者或潜在使用者具有特定的人口统计学特征,并且最终大多没有使用她们冷冻保存的卵子。这可能是由于多种原因,比如在冻卵后的生活中,她们的生育计划发生了改变,或者虽然有生育的想法但尚未尝试使用冷冻卵子。
  2. 卵子处置的选择
    • 对于未使用的卵子,存在多种处置方式。可以选择丢弃,这可能是因为女性认为自己不再需要这些卵子,或者缺乏合适的使用途径。也可以选择捐赠给其他女性,为那些有生育困难的女性提供帮助。此外,还可以捐赠给研究机构,用于相关的科学研究,以推动生育医学的发展。
  3. 对健康专业人员的指导意义
    • 了解计划性冻卵潜在使用者的主要特征,健康专业人员可以更加主动地宣传正确的冻卵知识,包括冻卵的风险、成功率以及后续可能面临的问题等。同时,在咨询过程中,也可以根据女性的年龄、婚姻状况和生育计划等因素,提供更加个性化的建议,帮助她们做出更有效的决策。

参考来源:Giannopapa M, Sakellaridi A, Pana A, Velonaki VS. Women Electing Oocyte Cryopreservation: Characteristics, Information Sources, and Oocyte Disposition: A Systematic Review. J Midwifery Womens Health. 2022 Mar;67(2):178-201. doi: 10.1111/jmwh.13332. Epub 2022 Feb 13. PMID: 35156301.

原始卵泡位于卵巢皮质中,处于静止状态。其数量在出生时就已确定(每个卵巢大约 60 万到 100 万个),并在儿童期和整个生育期持续逐渐减少,因为原始卵泡会被募集并离开静止状态。

大多数原始卵泡在初次募集后发生闭锁,无法达到窦状卵泡阶段,只有少数能继续生长直至排卵,在生育期大约排卵 450 次左右,只有极少数卵泡能发育成有受精能力的卵子。当原始卵泡几乎耗尽,只剩下大约 1000 个原始卵泡时,就会导致绝经。

随着女性生育观念的转变以及医学技术的飞速发展,冻卵技术作为一种生育力保存的手段,正逐渐走进大众的视野。这一技术为女性在面临生育挑战时提供了一种可能的解决方案,无论是因为职业发展、个人生活规划,还是由于疾病治疗等原因导致的生育延迟或生育风险增加。

一、冻卵技术的原理与方法

冻卵技术的核心原理是在极低的温度下保存卵子,使其代谢活动几乎停止,从而延长卵子的存活时间。目前主要有两种常见的冻卵方法:慢冻法和玻璃化冷冻法。

慢冻法是一种较为传统的方法,它通过逐步降低温度,让卵子在这个过程中逐渐适应低温环境。在这个过程中,会使用一些冷冻保护剂来减少冰晶的形成,因为冰晶可能会对卵子的结构造成损伤。具体来说,卵子首先在含有一定浓度冷冻保护剂的溶液中进行预处理,然后以相对缓慢的速度降温,经过多个阶段的温度调控,最终将卵子储存于液氮中,温度可达 -196°C。

玻璃化冷冻法则是一种更为先进的技术,它能够在更短的时间内实现卵子的冷冻。这种方法使用了更高浓度的冷冻保护剂,并且通过极快的冷却速度,使卵子在瞬间从液态转变为一种类似玻璃的固态,从而避免了冰晶的形成。玻璃化冷冻法在保护卵子的结构和功能方面具有一定的优势,因此近年来受到了越来越多的关注和应用。

二、冻卵技术的适用人群与临床应用

  1. 癌症患者的生育力保存 对于许多癌症患者,尤其是年轻女性,化疗、放疗等治疗手段可能会对卵巢功能造成不可逆的损害,导致生育能力丧失。冻卵技术为这些患者提供了在接受治疗前保存生育能力的机会。例如,在一些血液系统癌症或生殖系统癌症的治疗中,医生会建议患者在开始治疗前考虑冻卵。通过采集卵子并进行冷冻保存,患者在治愈癌症后,如果有生育的意愿,就有可能使用这些冷冻的卵子尝试受孕。
  2. 延迟生育的女性 随着社会的发展,越来越多的女性选择在事业有成之后再考虑生育问题。然而,女性的生育能力会随着年龄的增长而逐渐下降,尤其是在 35 岁之后,这种下降趋势更为明显。冻卵技术为这些希望延迟生育的女性提供了一种保障。她们可以在年轻、生育能力较强的时候将卵子冷冻保存,等到合适的时机再尝试受孕。

三、冻卵技术的临床效果与影响因素

  1. 卵子的存活率和受精率 冻卵技术的临床效果受到多种因素的影响。从卵子的存活率和受精率来看,不同的研究报道结果有所差异。一般来说,玻璃化冷冻法在卵子存活率和受精率方面可能表现出一定的优势。一些研究显示,玻璃化冷冻法的卵子存活率可达 90% 以上,受精率也在 70% - 90% 左右;而慢冻法的卵子存活率在 50% - 70% 左右,受精率在 60% - 70% 左右。然而,这些数据并不是绝对的,实际的存活率和受精率还会受到卵子本身的质量、冷冻保护剂的使用、冷冻和解冻的操作过程等多种因素的影响。
  2. 怀孕率和活产率 冻卵后的怀孕率和活产率也是衡量技术效果的重要指标。随着技术的不断发展,冻卵后的怀孕率和活产率也在逐步提高。例如,慢冻法的活产率从早期的较低水平逐渐上升,从 1996 - 2004 年的每移植 21.6% 提高到 20,02 - 2004 年的 32.4%;玻璃化冷冻法的活产率和持续怀孕率从 2004 年之前的 29.4% 提高到 2004 年之后的 39%。但需要注意的是,怀孕率和活产率还与女性的年龄、身体状况、受孕环境等多种因素密切相关。

冻卵技术作为一种新兴的生育力保存手段,为女性的生育选择提供了更多的可能性。然而,我们也应该清醒地认识到,这项技术仍然处于不断发展和完善的过程中,面临着诸多技术挑战和伦理法律问题。只有通过不断的研究和探索,才能使冻卵技术更好地服务于女性的生育健康,为更多女性实现生育梦想提供有力的支持。

参考文献:Cacciottola L, Donnez J, Dolmans MM. Ovarian tissue and oocyte cryopreservation prior to iatrogenic premature ovarian insufficiency. Best Pract Res Clin Obstet Gynaecol. 2022 May;81:119-133. doi: 10.1016/j.bpobgyn.2021.09.010. Epub 2021 Nov 15. PMID: 34887172.

在当今社会,女性面临着多种可能影响生育能力的因素,如癌症治疗、延迟生育等。因此,生育力保存成为了一个重要的研究领域,而冻卵技术作为其中的一种方法,正逐渐受到关注。其目的在于为面临生育风险的女性提供一种保存生育能力的选择,以便在未来需要时能够实现生育梦想。

冻卵技术的原理

为了长期保存细胞的活性,需要将细胞置于极低的温度下,使其进入一种类似于 “暂停生命活动” 的状态。对于哺乳动物细胞来说,通常使用的储存温度是 -196°C(液氮的温度)。在这个温度下,水呈固态,生物反应停止,对冻存细胞的主要威胁被认为是背景辐射对 DNA 造成的损伤。

然而,冻卵过程中最关键的是要避免在温度变化过程中对卵子造成损伤。当水冷却到冰点以下时会形成冰晶,冰晶的体积比液态水大,会对细胞内的细胞器造成压力和剪切力,导致细胞受损。因此,避免冰晶形成是成功冻卵的首要目标。此外,随着水的冻结,溶质被排除在固体之外,会使剩余未冻结溶液的溶质浓度升高,对细胞内蛋白质产生毒性,避免这种溶液效应是第二个目标。在解冻过程中,如果升温缓慢,会有自由水解冻和再结晶的危险,而快速升温则可能导致细胞外渗透压突然下降,引起自由水快速流入细胞,造成细胞肿胀和损伤,即渗透压冲击,避免这种情况是第三个目标。

为了实现这些目标,所有成功的冻卵方法都使用了一种叫做冷冻保护剂的化学物质。冷冻保护剂分为渗透性和非渗透性两类。渗透性冷冻保护剂是小分子物质,能够穿透细胞膜,与水分子形成氢键,防止冰晶形成,并在一定浓度下可使水形成玻璃化状态(一种固态但不膨胀的状态)。常用的渗透性冷冻保护剂有丙二醇(PROH)等。非渗透性冷冻保护剂则留在细胞外,通过从细胞内吸取自由水来使细胞内空间脱水,从而增加渗透性冷冻保护剂在细胞内的浓度,进一步协助防止冰晶形成。在解冻过程中,非渗透性冷冻保护剂还可以防止因细胞内冷冻保护剂不能快速扩散出去而导致的渗透压冲击,常用的非渗透性冷冻保护剂有蔗糖等。

冻卵的方法

  1. 慢冻法(Slow - Freeze)
    • 慢冻法在卵子仍处于代谢状态时使用较低的初始冷冻保护剂浓度,以降低毒性。冷冻保护剂通常在室温下添加,然后温度逐渐降低(约 2°C/min)到 -6°C 的播种温度。在这个温度下,通过用冰冷的器械触碰冻存容器的外部,引入一个小冰晶作为种子,诱导溶液中的冰晶形成。然后溶液在这个温度下保持一段时间(如 10 - 30 分钟)以达到平衡,之后温度再逐渐降低到 -32°C。在这个过程中,冰晶在细胞外介质中逐渐生长,冷冻保护剂浓度逐渐增加,特别是在细胞内空间,通过非渗透性冷冻保护剂进一步脱水。最后将冷冻容器投入液氮中。
    • 在解冻时,为了防止冰晶再结晶,需要快速升温,但要注意避免渗透性冷冻保护剂在细胞内高浓度引起的渗透压冲击,因此需要使用额外的非渗透性冷冻保护剂。随着渗透性冷冻保护剂逐渐从卵子中扩散出来,非渗透性冷冻保护剂的浓度逐渐降低,直到卵子被放回标准培养基中。
  2. 快速冷冻法(Vitrification)
    • 快速冷冻法(玻璃化冷冻)在室温下向细胞中添加高浓度的渗透性冷冻保护剂,由于这种高浓度的冷冻保护剂毒性较大,卵子不能在这个温度下长时间停留。经过短暂的平衡后,卵子直接投入液氮中。为了进一步防止冰晶形成,使用极快的冷却速度。在解冻时,也需要极快的升温速度以防止冰晶再结晶。

冻卵技术的临床应用

  1. 癌症患者的生育力保存
    • 对于新诊断出癌症且面临绝育治疗的女性来说,冻卵是一种保存生育能力的方法。化疗和放疗等癌症治疗方法可能会导致卵巢功能衰竭,而冻卵可以在治疗前进行。例如,卵巢皮质含有大量原始卵泡,可以通过腹腔镜采集卵巢皮质,然后进行冻存。或者也可以采集处于生发泡阶段的卵子进行冻存,尽管生发泡卵子的体外成熟技术还不太可靠。
    • 在癌症患者中使用冻卵技术也存在一些问题,如刺激卵泡和采集卵子所需的时间可能会延迟癌症治疗,而且对于患有全身性或播散性恶性肿瘤的患者,移植冻存的卵巢组织需要谨慎,因为可能存在残留的恶性细胞。
  2. 延迟生育
    • 随着社会的发展,越来越多的女性选择延迟生育。由于年龄的增长会导致生育能力下降,冻卵为这些女性提供了一种在年轻时保存卵子的方法,以便在未来想要生育时使用。然而,目前对于冻卵技术在延迟生育方面的应用,还缺乏长期的数据,例如需要冻存多少卵子才能实现满意的怀孕率还不确定。
  3. 伦理问题及其他应用
    • 冻卵技术为那些反对胚胎冷冻保存的夫妇提供了一种选择,也可以用于一些胚胎冷冻保存不合法的国家。此外,冻卵还可以用于卵子捐赠,通过冻存捐赠者的卵子,可以解决传统卵子捐赠中存在的一些问题,如捐赠者的可用性、成本、同步捐赠者和接受者的日程安排等。

冻卵技术的临床结果

  1. 存活率和受精率
    • 不同的研究报道了不同的卵子存活率和受精率。例如,一些研究使用慢冻法报道的卵子存活率在 50% - 70% 左右,受精率 60% - 70% 左右;而使用玻璃化冷冻法报道的卵子存活率和受精率可能更高,如一些研究中卵子存活率可达 90% 以上,受精率也在 70% - 90% 左右。
  2. 怀孕率和活产率
    • 从临床结果来看,冻卵后的怀孕率和活产率也在不断提高。慢冻法的活产率从 1996 - 2004 年的每移植 21.6% 提高到 2002 - 2004 年的 32.4%;玻璃化冷冻法的活产率和持续怀孕率从 2005 年之前的 29.4% 提高到 2005 年之后的 39%。同时,冻卵后的流产率也呈现出随着活产率提高而下降的趋势。

参考文献:Jain JK, Paulson RJ. Oocyte cryopreservation. Fertil Steril. 2006 Oct;86(4 Suppl):1037-46. doi: 10.1016/j.fertnstert.2006.07.1478. PMID: 17008147.

在人类辅助生殖领域,冷冻保存技术是一项非常重要的技术手段。它包括精子、胚胎和卵母细胞的冷冻保存。研究表明,精子和胚胎的冷冻保存已经成为常规操作,卵母细胞的冷冻保存也正逐渐在临床实践中得到更广泛的应用。

胚胎冷冻保存降低了新鲜胚胎移植的数量,提高了体外受精(IVF)周期的有效性。数据显示,同时进行新鲜胚胎和冷冻胚胎移植的女性,通过使用冷冻胚胎可获得额外 8% 的生育机会。卵母细胞冷冻保存相较于胚胎冷冻有更多优势,比如为因肿瘤治疗或慢性疾病面临生育力丧失风险的女性保存生育能力、用于卵子捐赠以及推迟生育等,还能避免胚胎冷冻所涉及的宗教和伦理道德问题。

冷冻保存技术的基本原理和方法

  1. 传统缓慢降温法
    • 冷冻保护剂的作用
      • 在胚胎和卵母细胞的冷冻保存过程中,防止冰晶形成和有毒溶质浓度过高是关键,这两者是导致细胞死亡的主要原因。为了实现这一点,细胞悬浮的冷冻溶液中需要添加冷冻保护剂(CPA)。CPA 分为细胞内 / 膜渗透性(如丙二醇、二甲基亚砜、甘油、乙二醇等)和细胞外 / 膜非渗透性化合物(如蔗糖、海藻糖、葡萄糖、蛋白质、脂蛋白等)。渗透性 CPA 通过渗透梯度置换水分,部分占据细胞内水的位置,而非渗透性 CPA 则增加细胞外渗透压,在冷冻前支持细胞脱水,解冻后防止水分快速进入细胞。
    • 不同阶段的处理
      • 对于人类胚胎和卵母细胞,在缓慢降温前,通常会让其暴露于渗透性和非渗透性 CPA 的混合物中 10 分钟进行脱水。对于早期卵裂阶段的胚胎和卵母细胞,常用低浓度的丙二醇(1.5M)和蔗糖(0.1 - 0.25 - 0.5M),而囊胚阶段的胚胎则常用甘油。以最初成功的小鼠和牛胚胎冷冻保存协议为例,是将胚胎以 - 0.3°C - 0.5°C/min 的缓慢降温速率冷却到 - 80°C - 120°C,但这个过程很长(几个小时)。后来有了改进的方法,如将绵羊和牛胚胎以 0.3°C/min 的速率缓慢冷却到 - 30 - 35°C 后,再浸入液氮中,大大缩短了冷冻过程(1.0 - 1.5 小时)。人类胚胎一般是以 0.3°C/min 的低冷却速率冷却到约 - 30°C - 40°C,然后以 - 50°C/min 的速率增加冷却到 - 80°C - 150°C 后再浸入液氮中。在缓慢降温过程中,手动在 5 到 - 8°C 之间诱导冰晶成核(播种),缓慢冷却到 - 30°C - 40°C 后再快速冷却到 - 196°C 的胚胎 / 卵母细胞,需要在 25°C - 37°C 的温水中快速解冻,然后逐步去除 CPA 进行细胞再水化。
  2. 玻璃化(超快速冷冻保存)法
    • 技术原理
      • 玻璃化是一种不同于缓慢降温的冷冻保存方法,它是在低温下通过极端提高粘度使溶液固化,避免冰晶在细胞内和细胞外空间形成。这是通过高浓度的 CPA(4 - 8mol/L)和极高(超快速)的冷却速率实现的。在玻璃化过程中,细胞主要在超快速冷却开始前通过暴露于高浓度的 CPA 进行脱水,以获得玻璃化的细胞内和细胞外状态。但玻璃化过程中 CPA 的高浓度可能对细胞有毒性,不过可以通过混合不同的 CPA 来降低每种 CPA 的相对浓度,并将胚胎 / 卵母细胞暴露于溶液的时间减到最少来控制毒性。
    • 操作要点
      • 用于玻璃化的冷冻溶液由渗透性(如 EG、G、DMSO、PG、乙酰胺等)和非渗透性(如蔗糖、海藻糖等)试剂组成,有些协议还会补充大分子物质如聚乙二醇等。为了提高冷却速率,胚胎 / 卵母细胞玻璃化的溶液体积已被大幅减小(0.1 - 2μL),并开发了特殊的载体系统,如开放式拉伸吸管、Flexipet - 剥脱移液器、Cryotop 等。玻璃化技术操作难度较大,因为胚胎 / 卵母细胞必须在极短时间(<1min)内处理非常浓缩、粘稠且体积小的玻璃化溶液,所以操作人员需要经过良好的培训。

人类胚胎和卵母细胞冷冻保存的实践经验及安全性

  1. 胚胎冷冻保存的实践经验
    • 不同阶段的效果
      • 对于人类胚胎冷冻保存,早期卵裂阶段胚胎解冻后至少保留一半初始卵裂球被认为是存活的。在一项大型多中心研究中,14000 个早期卵裂阶段缓慢冷冻和解冻的胚胎中,73% 的胚胎至少有一半初始卵裂球仍然完整,移植后的临床妊娠率和着床率分别为 16% 和 8.4%。对于囊胚冷冻保存,常用甘油和蔗糖的组合作为冷冻溶液,报道的内细胞团和滋养层细胞至少 50% 存活的存活率在 69% - 98% 之间,着床率在 16% - 30% 左右。早期卵裂阶段人类胚胎已成功在多种基于 DMSO、EG 等的溶液中玻璃化,存活率约 60% - 80%,且有多个妊娠 / 分娩案例。囊胚玻璃化常用 EG 和 DMSO 的混合物作为溶液,报道的总体存活率在 70% - 99% 之间,着床率在 20% - 50% 左右。
    • 不同方法的比较
      • 在一些比较研究中,发现玻璃化和缓慢降温在胚胎存活和着床率方面各有优劣。例如,在某些情况下玻璃化的卵裂阶段和囊胚阶段胚胎解冻后存活率较高,但在有经验的群体中,玻璃化并不比缓慢降温有更高的怀孕概率。
  2. 卵母细胞冷冻保存的实践经验
    • 不同方法的影响
      • 在缓慢冷冻卵母细胞方面,提高蔗糖浓度(从 0.1M 到 0.3M)可以提高脱水率以及 MII 卵母细胞的存活率和受精率。改变 CPA 的平衡温度、冰晶成核和将胚胎浸入液氮的操作,以及用胆碱替代钠或直接向卵母细胞细胞质中注射蔗糖等方法都能提高卵母细胞的存活率。但缓慢冷却的卵母细胞相对于新鲜对照组发育较慢。在玻璃化卵母细胞方面,常用的玻璃化溶液由渗透性(2.7M EG 和 2.1M DMSO)和非渗透性 CPA(0.5M 蔗糖)组成,改进的玻璃化技术提高了玻璃化人类卵母细胞解冻后的存活率和受精率,与新鲜对照卵母细胞相当。

参考文献:Konc J, Kanyó K, Kriston R, Somoskői B, Cseh S. Cryopreservation of embryos and oocytes in human assisted reproduction. Biomed Res Int. 2014;2014:307268. doi: 10.1155/2014/307268. Epub 2014 Mar 23. PMID: 24779007; PMCID: PMC3980916.

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