随着国家种种出生缺陷防治措施的实施，我国缺陷儿出生率大大降低，尤其是近年来无创DNA的临床应用，更是为降低出生缺陷做出了巨大贡献。但是，我们要深刻认识到无创DNA检测的定性，它仅仅是对胎儿目标染色体的准确率比较高的一种筛查方法。检测结果为低风险，表明胎儿99%的概率不是T21三体综合征患儿；检测结果为高风险，表明胎儿是T21三体综合征患儿的概率仅仅为80%左右。因此，高风险孕妇需进一步行介入性产前诊断去确诊。那么，为什么无创DNA仅仅是筛查而不是确诊呢？今天，我们就来给大家讲解一下具体原因。

无创产前DNA检测（Non-invasive Prenatal Testing）又称为无创DNA产前检测、无创胎儿染色体非整倍体检测等，以下简称“无创”。

无创检测的基础: 无创检测的对象是孕妇外周血中的胎儿游离DNA片段，这些游离DNA片段来自胎盘绒毛外层凋亡的滋养层细胞，检测目的是发现T21、18、13三体胎儿。最近一项Meta分析显示，无创对于胎儿非整倍体的检出具有高灵敏度和高特异性

虽然无创假阴性的概率很低，但客观存在。除了技术原因（例如缺乏足够的内部质量控制指标），造成假阴性或假阳性的原因，或来自胎儿或来自母体。胎儿因素包括胎儿游离DNA比例不足、胎儿胎盘嵌合体、双胎之一胚胎停育等；母体因素包括母体本身拷贝数异常、母体恶性肿瘤等。由于无创检测的是母体与胎儿胎盘的混合DNA，因此使得无创检测只能成为筛查而不是诊断方法

无创假阳性、假阴性结果常见原因

限制性胎盘嵌合体（CPM）

CPM即胎盘出现染色体嵌合体，而胎儿核型正常。胎儿游离DNA起源于胎盘绒毛的细胞滋养层，细胞滋养层细胞的不断更替诱导细胞凋亡，并将胎儿游离DNA释放到母体血液中。大多数情况下，嵌合体类型以CPM为主，其中异常的细胞系局限于细胞滋养层和绒毛的间充质部位，而胎儿具有正常的核型，根据嵌合程度可能导致无创假阳性结果

双胎之一胚胎停育

双胞胎或多胞胎之一胚胎停育病例中，大约一半的胚胎停育原因是胎儿的染色体异常引起；停育胚胎持续释放到母体外周血的游离DNA片段会影响无创结果的准确性，从而导致无创结果假阳性

母体恶性肿瘤

由于凋亡的恶性细胞释放游离DNA到母体外周血中，导致无创结果假阳性。Bettegowda等人的研究表明，80%的已知转移性实体肿瘤患者和50%的已知局限性肿瘤患者都发现了异常的细胞游离DNA

自身免疫性疾病

由于炎症反应会增加母体血液中的游离DNA ，胎儿来源的游离DNA比例随着母体细胞来源游离DNA的增加而浓度降低，因此患有自身免疫性疾病的孕妇易出现低胎儿游离DNA分数，而导致检测失败。此外，系统性红斑狼疮（SLE）患者T细胞异常甲基化，与T细胞凋亡导致血液中低甲基化游离DNA增多以及游离DNA的片段缩短，进而影响无创结果的准确性

肝素

由于肝素与母体血液中的白细胞结合诱导细胞凋亡是母体血液中游离DNA片段增加的一个因素，因此接受肝素治疗的孕妇母体外周血游离DNA含量增加，进而导致胎儿游离DNA分数降低影响无创准确性。此外，接受肝素治疗的孕妇胎儿游离DNA片段大小略低于没有接受肝素治疗的孕妇，且片段GC含量增加。因为肝素半衰期短，可在停用肝素36小时后采血，将其影响降到最低

无创检测不分离母体血液中胎儿的游离DNA，只是比较母体和胎儿的总游离DNA比例是否符合正常人群标准。当母体和胎儿都是正常核型时，比例符合正常人群标准。当胎儿为21三体时，21号染色体比值增高，超出正常人群标准，故无创检测结果为阳性。同理，当母亲为拷贝数异常患者，比值高出正常人群标准，无创检测结果受母体干扰为异常结果，此为检测结果假阳性。

无创检测之前应对孕妇进行遗传咨询，充分沟通告知。假阳性和假阴性很可能是胎盘生物学异常的结果，而不是实验测试平台的失败。告知游离DNA的胎盘来源可以让孕妇清楚地了解基于游离DNA产前筛查的能力和局限性。