蛛网膜是一层半透明的薄膜，位于硬脊膜和软脊膜之间，它向上与脑蛛网膜相连接，脊髓蛛网膜与软脊膜之间叫做蛛网膜下隙，两层膜之间有许多结缔组织小梁相连，其中充满脑脊液。脊髓蛛网膜下隙的下部，从脊髓下端马尾神经根部至第2骶椎水平扩大的马尾神经周围的蛛网膜下隙叫做终池，内容马尾。临床上常在第3、4或第4、5腰椎间进行腰椎穿刺，从这里抽取脑脊液或注入药物而不伤及脊髓。脊髓蛛网膜下隙向上与脑蛛网膜下隙相通。脑蛛网膜除在大脑纵裂和大脑横裂处以外，均跨越脑沟裂而不深入沟内。