医生首先会询问是否有外伤史、感染史、心脏病史，来判断病因。同时会紧急检查生命体征和心脏，包括呼吸、血压、脉搏、体温、心脏听诊等。

如果生命体征平稳，会进一步检查以明确诊断。如果出现血压低于 90/60 毫米汞柱、心率超过 100 次/分钟等紧急情况，一般会先实施抢救，待生命体征好转后再继续检查。

如果怀疑急性二尖瓣关闭不全， 一般会紧急做超声心动图和胸部 X 线检查（胸片），结合病史和查体，通常就可以明确诊断。病情紧急时，在病床边就可以做这些检查。

• 胸片可以查看肺淤血情况以及是否有心脏增大，发现这些迹象则高度提示可能患二尖瓣关闭不全。
• 超声心动图是确诊性检查。可以查看心肌结构、功能有没有被破坏，观察二尖瓣的形态、大小以及受损程度、血流是否反流入左心房。据此一般就可以明确诊断。

通常还会抽血查心肌损伤标志物，包括肌钙蛋白（cTn）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）等，目的是排除心肌梗死等其他紧急情况。