探索隐匿性乙型肝炎：免疫组织化学与S基因序列分析

近年来，越来越多的研究结果表明，部分HBsAg自然转阴的急性或慢性乙型肝炎患者，其血清中仍可检测到低水平的HBV DNA（定量PCR法）。这种HBsAg阴性、HBV DNA阳性的HBV感染形式被称为隐匿性乙型肝炎或沉默性乙型肝炎（silent hepatitis B）。在原因不明的慢性肝病患者中，隐匿性乙型肝炎占较高的比例，约为30％～35％，在抗一HBc阳性、抗一HBs阴性的原因不明的慢性肝病患者中，隐匿性乙型肝炎所占的比例更高，最高可达60％。

本文报道的20例原因不明的肝病患者中，有5例（25％）经肝脏病理、免疫组织化学和HBV DNA检查（套式PCR方法），确诊为慢性隐匿性乙型肝炎，表明在我国隐匿性乙型肝炎是不明原因慢性肝病的重要原因，仅次于脂肪肝。隐匿性乙型肝炎患者的血清HBV DNA水平较低，一般在100拷贝／mL以下，平均10拷贝／mL。然而，临床上常用的HBV DNA定量检测方法（荧光定量PCR、bDNA等）可能不适合于隐匿性乙型肝炎患者HBV DNA的检测，应采用更敏感的定量方法（如Amplicor等，检测低限可至3×10拷贝／mL）。

由于少数健康者血清中也可检测到低水平的HBV DNA（1.7％），并且目前对如此低水平的HBV DNA能否引起慢性肝炎尚存在争议，所以在诊断隐匿性乙型肝炎时肝活检病理和免疫组织化学检查极为重要。本文5例患者肝组织均显示有不同程度的慢性炎症，并检测到HBcAg或HBsAg，成为确诊隐匿性乙型肝炎的主要依据之一。

目前认为，隐匿性HBV感染的机制包括S基因变异、HBV的整合、PBMCs感染、含HBV免疫复合物的形成、HBsAg低于检测下限和病毒之间相互作用等。然而，本研究提示，隐匿性乙型肝炎HBsAg阴性的原因仅部分归因于S基因变异，主要原因可能为低水平HBV DNA导致HBsAg水平过低，造成HBsAg检测阴性。总之，在我国隐匿性乙型肝炎是不明原因肝病的主要原因之一，低水平的血清HBV DNA可以引起慢性肝炎。部分隐匿性乙型肝炎HBsAg阴性的原因是S基因变异引起的，而有些患者在HBsAg⋯a’决定簇内未发现变异HBsAg阴性的主要原因可能为血清HBsAg水平过低，导致HBsAg检测阴性。