给学校的建议：

对于患有分离性焦虑障碍的儿童，上学是一件痛苦的事，拒绝上学可能很常见。但是理解孩子拒绝上学的一些深层原因之后，可以帮助他们减轻分离性焦虑障碍引起的症状。

• 帮助缺席的孩子尽快返校。最开始可以减少他们上学的时间，当孩子们发现自己可以克服这种分离引起的不适时，他们的症状就可能减轻。
• 与学校商量，允许孩子迟到。如果学校最初能对迟到保持宽容态度，这能为家长和孩子多一些沟通、慢一点分离留有余地。
• 找到一个让孩子感到安全的地方。在学校找到一个地方，让你的孩子在压力大的时候可以去那里，以减轻他们的焦虑。
• 允许孩子与家庭联络。当孩子在学校感到焦虑和压力时，允许他们给家里打一个 1-2 分钟的电话，可能减轻焦虑情绪。
• 给孩子写一些小纸条。你可以把这些小纸条放在孩子的饭盒或小柜子里。有时，即便是手帕上的一句“我爱你！”都可以重新使孩子们感到安定。
• 在孩子与同龄人的交往中给与协助。在你的孩子和同龄人交往的过程中，，无论是老师还是其他成年人的帮助都可能是有益的。
• 对孩子的努力给予回报。每一个努力、或者朝着正确的方向前进的一小步，都值得被赞扬。

给家长的建议：

• 如果孩子的父母本身就很容易出现紧张和焦虑，那么孩子患分离性焦虑障碍的可能性更大。为了帮助孩子减轻焦虑症状，你可能需要采取一些措施让你自己更加冷静、专心，通过控制你自己的压力和焦虑来帮助孩子。
• 谈论自己的感受。即使在无法改变周围紧张环境的时候，表达出你内心的所思所想或最近的经历都会是让人感到通透、神清气爽的。
• 规律体育锻炼，体育活动在减轻、避免压力引起的不良后果中扮演着重要角色。
• 正确饮食，一个营养良好的身体能够更好地应对压力，因此多吃水果、蔬菜和健康脂肪，尽量不吃垃圾食品、甜食及精制碳水。
• 学会放松，你可以通过一些放松方法如瑜伽、深呼吸、冥想等来控制你的压力水平。
• 充足睡眠，劳累会增加你的压力，让你感到暴躁和昏昏沉沉。充足的睡眠可以直接改善你的情绪和醒时的生活工作质量。
• 保持幽默，开怀大笑能在多方面帮助你的身体对抗压力。

没有人愿意看着自己的孩子处于痛苦之中，所以回避他们害怕的东西可能是一种更具有吸引力的做法。但是，长期应用这种方式可能只会加剧孩子们的恐惧。相比尽可能避免分离，更好的办法是通过几个步骤，帮助你的孩子战胜分离时的焦虑障碍，让他们感到安全。

提供安全的家庭环境

• 在家里营造一个和谐的环境有助于让孩子们感到更舒服。

了解分离性焦虑障碍的一些知识

• 如果你了解了孩子们是如何经历焦虑障碍的，你会对他们的艰难更加感同身受。

倾听和尊重孩子们的感受

• 对于一个在焦虑障碍中感觉孤单的孩子，被倾听的经历会产生强有力的治疗效应。

谈论问题

• 孩子们谈论自己的感受是有利于健康的行为——他们不会受益于“不要想这些事情了”这种话。试着理解他们的感受，但是也要温柔地提醒他们——他们会成功度过最后一次分离的。

事先预期分离的难度

• 对于可能引起孩子分离焦虑的一些转折点，比如上学、与朋友聚会等，要事先做好准备。如果孩子与双亲中其中一方的分离比另外一方要容易一些时，让更容易分离的一方来处理这些事情。

在分离时保持冷静

• 如果你的孩子看到你可以这样泰然处之，他们也会变得更加冷静。

支持孩子参加活动

• 要鼓励你的孩子参加健康的社交及体育活动。这些活动是减轻焦虑、协助发展友谊的好途径。

赞美孩子们付出的努力

• 将孩子们取得的小小的成就——不哭不闹安静上床睡觉、来自学校的赞扬等，作为给予他们正向强化的力量。

分离性焦虑障碍的发生可能与儿童在某种程度上的不安全感有关。建议你检视一下可能影响到孩子生活、使他们感到有威胁或使他们日常感到心烦的可能因素。如果你能发现引起问题的根源，那么距离帮助孩子度过这个难关又近了一步。

儿童分离性焦虑障碍的常见原因包括：

• 环境的改变。周围环境的改变，包括新家、新学校或新的日常照护环境，都能触发分离性焦虑障碍的发作。
• 压力。充满压力的情境，比如转学、离婚、亲近之人的过世——包括宠物，可以触发分离性焦虑障碍的发作。
• 过度保护的父母。某些情况下，儿童的分离性焦虑障碍可能是你自己压力或焦虑的另一种表现。父母和孩子可以互相加剧彼此的焦虑。
• 不安全的关系。关系纽带是婴儿和他的主要照护者之间的情感连结。安全的纽带可以保证你的孩子在成长过程中感到安全、理解和冷静，不安全的纽带可以加剧儿童在分离时的焦虑问题。

分离性焦虑障碍不是成长过程中的正常现象，而是一个严重的情绪问题，它以儿童与主要照育者分离时的极端痛苦为特征。

然而，由于正常的分离焦虑与分离性焦虑障碍的有些症状相同，想弄清儿童是仅仅需要一些时间和适应，还是出现了更严重的问题，是有一定困难的。

正常的分离焦虑与分离性焦虑障碍之间主要的不同点是儿童恐惧的程度，以及这种恐惧是否影响了他们的日常生活。患有分离性焦虑障碍的儿童在一想到父母会离开的时候就会变得暴躁，甚至出现抱怨自己身体不舒服以避免社交或上学的情况。

当这些症状变得足够极端时，可以累加成为一种焦虑障碍。但是无论你的孩子在和你分离时有多么焦躁，分离性焦虑障碍是可以治疗的。你可以做很多事情，让孩子们感到安全，减轻他们分离时的焦虑。

对于有正常分离焦虑情绪的儿童，可尝试以下步骤，使父母和孩子分离的过程变得容易一些。

演练分离过程。把你的孩子交给托管员照顾。首先，从托管一段很短的时间和较近的距离开始，当你的孩子渐渐习惯这种分离时，你可以逐渐离开更长的时间和更远的距离。

将分离安排在小睡或喂食后。孩子们在劳累或饥饿的时候可能更容易受到分离焦虑的影响。所以,你可以尝试在孩子小睡了一觉或者进食以后离开一段时间，也许他的焦虑情绪就不会那么明显。

例行简短迅速的“再见”。这种惯例可以简短到一个隔窗的挥手或一个临别的吻，尽量做到迅速一些。

离开的时候不要大张旗鼓。告诉你的孩子你要离开一下但会回来，然后直接离开——不要拖延，不要把这件事情看做一件大事。

 

遵守诺言。想要你的孩子形成面对分离的自信，遵守承诺按时回来非常重要。

 

尽可能保持周围环境的熟悉程度，并将新环境变得熟悉起来。

 

有一位长期不变的护理人员。如果你雇用了一位护理人员，尝试让他们长期工作，以避免儿童在成长过程中经历频繁的大的变化。

 

尽量少看恐怖的电视节目，让孩子多处于安静祥和的氛围和情绪中。

 

不要屈服。不要因为孩子哭闹就妥协，其实只要让孩子感到安心他们就会很好。每次分离要设定不变的底线，会帮助你的孩子适应分离。

 

 

冻卵，受到了越来越多的关注。但你对冻卵女性了解有多少？她们年龄多大？冻卵后她们又如何使用的？通过1篇荟萃分析我们来一起揭秘。

一、研究方法

研究人员按照系统综述和荟萃分析的首选报告项目（PRISMA）建议进行了系统综述。他们搜索了 PubMed、Scopus 和 Web of Science 从建库到 2021 年 1 月的文献，对发表日期没有限制。纳入的研究需为英文，且研究了计划性冻卵的使用者或潜在使用者的特征、最初信息来源以及卵子处置情况。提取的数据通过主题分析进行分析，纳入研究的方法学质量使用 QualSyst 标准进行评估。

二、研究结果

1. 研究筛选情况
   • 最初检索到 1074 条记录，其中 29 项研究符合纳入标准，包括 12 项定性研究和 17 项定量研究。调查的回复率在 38% - 85% 之间。
2. 女性特征
   • 计划性冻卵的使用者或潜在使用者大多为单身、受过高等教育、有工作，平均年龄为 37 岁。
3. 信息来源
   • 媒体和朋友是计划性冻卵最初知识的最常见来源，而健康专业人员则是较不常见的来源。
4. 卵子使用情况
   • 大多数计划性冻卵者没有尝试使用冷冻卵子怀孕，但她们并不后悔进行了该过程。

三、讨论与启示

1. 人口特征与卵子使用
   • 计划性冻卵的大多数使用者或潜在使用者具有特定的人口统计学特征，并且最终大多没有使用她们冷冻保存的卵子。这可能是由于多种原因，比如在冻卵后的生活中，她们的生育计划发生了改变，或者虽然有生育的想法但尚未尝试使用冷冻卵子。
2. 卵子处置的选择
   • 对于未使用的卵子，存在多种处置方式。可以选择丢弃，这可能是因为女性认为自己不再需要这些卵子，或者缺乏合适的使用途径。也可以选择捐赠给其他女性，为那些有生育困难的女性提供帮助。此外，还可以捐赠给研究机构，用于相关的科学研究，以推动生育医学的发展。
3. 对健康专业人员的指导意义
   • 了解计划性冻卵潜在使用者的主要特征，健康专业人员可以更加主动地宣传正确的冻卵知识，包括冻卵的风险、成功率以及后续可能面临的问题等。同时，在咨询过程中，也可以根据女性的年龄、婚姻状况和生育计划等因素，提供更加个性化的建议，帮助她们做出更有效的决策。

参考来源：Giannopapa M, Sakellaridi A, Pana A, Velonaki VS. Women Electing Oocyte Cryopreservation: Characteristics, Information Sources, and Oocyte Disposition: A Systematic Review. J Midwifery Womens Health. 2022 Mar;67(2):178-201. doi: 10.1111/jmwh.13332. Epub 2022 Feb 13. PMID: 35156301.

原始卵泡位于卵巢皮质中，处于静止状态。其数量在出生时就已确定（每个卵巢大约 60 万到 100 万个），并在儿童期和整个生育期持续逐渐减少，因为原始卵泡会被募集并离开静止状态。

大多数原始卵泡在初次募集后发生闭锁，无法达到窦状卵泡阶段，只有少数能继续生长直至排卵，在生育期大约排卵 450 次左右，只有极少数卵泡能发育成有受精能力的卵子。当原始卵泡几乎耗尽，只剩下大约 1000 个原始卵泡时，就会导致绝经。

随着女性生育观念的转变以及医学技术的飞速发展，冻卵技术作为一种生育力保存的手段，正逐渐走进大众的视野。这一技术为女性在面临生育挑战时提供了一种可能的解决方案，无论是因为职业发展、个人生活规划，还是由于疾病治疗等原因导致的生育延迟或生育风险增加。

一、冻卵技术的原理与方法

冻卵技术的核心原理是在极低的温度下保存卵子，使其代谢活动几乎停止，从而延长卵子的存活时间。目前主要有两种常见的冻卵方法：慢冻法和玻璃化冷冻法。

慢冻法是一种较为传统的方法，它通过逐步降低温度，让卵子在这个过程中逐渐适应低温环境。在这个过程中，会使用一些冷冻保护剂来减少冰晶的形成，因为冰晶可能会对卵子的结构造成损伤。具体来说，卵子首先在含有一定浓度冷冻保护剂的溶液中进行预处理，然后以相对缓慢的速度降温，经过多个阶段的温度调控，最终将卵子储存于液氮中，温度可达 -196°C。

玻璃化冷冻法则是一种更为先进的技术，它能够在更短的时间内实现卵子的冷冻。这种方法使用了更高浓度的冷冻保护剂，并且通过极快的冷却速度，使卵子在瞬间从液态转变为一种类似玻璃的固态，从而避免了冰晶的形成。玻璃化冷冻法在保护卵子的结构和功能方面具有一定的优势，因此近年来受到了越来越多的关注和应用。

二、冻卵技术的适用人群与临床应用

1. 癌症患者的生育力保存 对于许多癌症患者，尤其是年轻女性，化疗、放疗等治疗手段可能会对卵巢功能造成不可逆的损害，导致生育能力丧失。冻卵技术为这些患者提供了在接受治疗前保存生育能力的机会。例如，在一些血液系统癌症或生殖系统癌症的治疗中，医生会建议患者在开始治疗前考虑冻卵。通过采集卵子并进行冷冻保存，患者在治愈癌症后，如果有生育的意愿，就有可能使用这些冷冻的卵子尝试受孕。
2. 延迟生育的女性 随着社会的发展，越来越多的女性选择在事业有成之后再考虑生育问题。然而，女性的生育能力会随着年龄的增长而逐渐下降，尤其是在 35 岁之后，这种下降趋势更为明显。冻卵技术为这些希望延迟生育的女性提供了一种保障。她们可以在年轻、生育能力较强的时候将卵子冷冻保存，等到合适的时机再尝试受孕。

三、冻卵技术的临床效果与影响因素

1. 卵子的存活率和受精率 冻卵技术的临床效果受到多种因素的影响。从卵子的存活率和受精率来看，不同的研究报道结果有所差异。一般来说，玻璃化冷冻法在卵子存活率和受精率方面可能表现出一定的优势。一些研究显示，玻璃化冷冻法的卵子存活率可达 90% 以上，受精率也在 70% - 90% 左右；而慢冻法的卵子存活率在 50% - 70% 左右，受精率在 60% - 70% 左右。然而，这些数据并不是绝对的，实际的存活率和受精率还会受到卵子本身的质量、冷冻保护剂的使用、冷冻和解冻的操作过程等多种因素的影响。
2. 怀孕率和活产率 冻卵后的怀孕率和活产率也是衡量技术效果的重要指标。随着技术的不断发展，冻卵后的怀孕率和活产率也在逐步提高。例如，慢冻法的活产率从早期的较低水平逐渐上升，从 1996 - 2004 年的每移植 21.6% 提高到 20，02 - 2004 年的 32.4%；玻璃化冷冻法的活产率和持续怀孕率从 2004 年之前的 29.4% 提高到 2004 年之后的 39%。但需要注意的是，怀孕率和活产率还与女性的年龄、身体状况、受孕环境等多种因素密切相关。

冻卵技术作为一种新兴的生育力保存手段，为女性的生育选择提供了更多的可能性。然而，我们也应该清醒地认识到，这项技术仍然处于不断发展和完善的过程中，面临着诸多技术挑战和伦理法律问题。只有通过不断的研究和探索，才能使冻卵技术更好地服务于女性的生育健康，为更多女性实现生育梦想提供有力的支持。

参考文献：Cacciottola L, Donnez J, Dolmans MM. Ovarian tissue and oocyte cryopreservation prior to iatrogenic premature ovarian insufficiency. Best Pract Res Clin Obstet Gynaecol. 2022 May;81:119-133. doi: 10.1016/j.bpobgyn.2021.09.010. Epub 2021 Nov 15. PMID: 34887172.

在当今社会，女性面临着多种可能影响生育能力的因素，如癌症治疗、延迟生育等。因此，生育力保存成为了一个重要的研究领域，而冻卵技术作为其中的一种方法，正逐渐受到关注。其目的在于为面临生育风险的女性提供一种保存生育能力的选择，以便在未来需要时能够实现生育梦想。

冻卵技术的原理

为了长期保存细胞的活性，需要将细胞置于极低的温度下，使其进入一种类似于 “暂停生命活动” 的状态。对于哺乳动物细胞来说，通常使用的储存温度是 -196°C（液氮的温度）。在这个温度下，水呈固态，生物反应停止，对冻存细胞的主要威胁被认为是背景辐射对 DNA 造成的损伤。

然而，冻卵过程中最关键的是要避免在温度变化过程中对卵子造成损伤。当水冷却到冰点以下时会形成冰晶，冰晶的体积比液态水大，会对细胞内的细胞器造成压力和剪切力，导致细胞受损。因此，避免冰晶形成是成功冻卵的首要目标。此外，随着水的冻结，溶质被排除在固体之外，会使剩余未冻结溶液的溶质浓度升高，对细胞内蛋白质产生毒性，避免这种溶液效应是第二个目标。在解冻过程中，如果升温缓慢，会有自由水解冻和再结晶的危险，而快速升温则可能导致细胞外渗透压突然下降，引起自由水快速流入细胞，造成细胞肿胀和损伤，即渗透压冲击，避免这种情况是第三个目标。

为了实现这些目标，所有成功的冻卵方法都使用了一种叫做冷冻保护剂的化学物质。冷冻保护剂分为渗透性和非渗透性两类。渗透性冷冻保护剂是小分子物质，能够穿透细胞膜，与水分子形成氢键，防止冰晶形成，并在一定浓度下可使水形成玻璃化状态（一种固态但不膨胀的状态）。常用的渗透性冷冻保护剂有丙二醇（PROH）等。非渗透性冷冻保护剂则留在细胞外，通过从细胞内吸取自由水来使细胞内空间脱水，从而增加渗透性冷冻保护剂在细胞内的浓度，进一步协助防止冰晶形成。在解冻过程中，非渗透性冷冻保护剂还可以防止因细胞内冷冻保护剂不能快速扩散出去而导致的渗透压冲击，常用的非渗透性冷冻保护剂有蔗糖等。

冻卵的方法

1. 慢冻法（Slow - Freeze）
   • 慢冻法在卵子仍处于代谢状态时使用较低的初始冷冻保护剂浓度，以降低毒性。冷冻保护剂通常在室温下添加，然后温度逐渐降低（约 2°C/min）到 -6°C 的播种温度。在这个温度下，通过用冰冷的器械触碰冻存容器的外部，引入一个小冰晶作为种子，诱导溶液中的冰晶形成。然后溶液在这个温度下保持一段时间（如 10 - 30 分钟）以达到平衡，之后温度再逐渐降低到 -32°C。在这个过程中，冰晶在细胞外介质中逐渐生长，冷冻保护剂浓度逐渐增加，特别是在细胞内空间，通过非渗透性冷冻保护剂进一步脱水。最后将冷冻容器投入液氮中。
   • 在解冻时，为了防止冰晶再结晶，需要快速升温，但要注意避免渗透性冷冻保护剂在细胞内高浓度引起的渗透压冲击，因此需要使用额外的非渗透性冷冻保护剂。随着渗透性冷冻保护剂逐渐从卵子中扩散出来，非渗透性冷冻保护剂的浓度逐渐降低，直到卵子被放回标准培养基中。
2. 快速冷冻法（Vitrification）
   • 快速冷冻法（玻璃化冷冻）在室温下向细胞中添加高浓度的渗透性冷冻保护剂，由于这种高浓度的冷冻保护剂毒性较大，卵子不能在这个温度下长时间停留。经过短暂的平衡后，卵子直接投入液氮中。为了进一步防止冰晶形成，使用极快的冷却速度。在解冻时，也需要极快的升温速度以防止冰晶再结晶。

冻卵技术的临床应用

1. 癌症患者的生育力保存
   • 对于新诊断出癌症且面临绝育治疗的女性来说，冻卵是一种保存生育能力的方法。化疗和放疗等癌症治疗方法可能会导致卵巢功能衰竭，而冻卵可以在治疗前进行。例如，卵巢皮质含有大量原始卵泡，可以通过腹腔镜采集卵巢皮质，然后进行冻存。或者也可以采集处于生发泡阶段的卵子进行冻存，尽管生发泡卵子的体外成熟技术还不太可靠。
   • 在癌症患者中使用冻卵技术也存在一些问题，如刺激卵泡和采集卵子所需的时间可能会延迟癌症治疗，而且对于患有全身性或播散性恶性肿瘤的患者，移植冻存的卵巢组织需要谨慎，因为可能存在残留的恶性细胞。
2. 延迟生育
   • 随着社会的发展，越来越多的女性选择延迟生育。由于年龄的增长会导致生育能力下降，冻卵为这些女性提供了一种在年轻时保存卵子的方法，以便在未来想要生育时使用。然而，目前对于冻卵技术在延迟生育方面的应用，还缺乏长期的数据，例如需要冻存多少卵子才能实现满意的怀孕率还不确定。
3. 伦理问题及其他应用
   • 冻卵技术为那些反对胚胎冷冻保存的夫妇提供了一种选择，也可以用于一些胚胎冷冻保存不合法的国家。此外，冻卵还可以用于卵子捐赠，通过冻存捐赠者的卵子，可以解决传统卵子捐赠中存在的一些问题，如捐赠者的可用性、成本、同步捐赠者和接受者的日程安排等。

冻卵技术的临床结果

1. 存活率和受精率
   • 不同的研究报道了不同的卵子存活率和受精率。例如，一些研究使用慢冻法报道的卵子存活率在 50% - 70% 左右，受精率 60% - 70% 左右；而使用玻璃化冷冻法报道的卵子存活率和受精率可能更高，如一些研究中卵子存活率可达 90% 以上，受精率也在 70% - 90% 左右。
2. 怀孕率和活产率
   • 从临床结果来看，冻卵后的怀孕率和活产率也在不断提高。慢冻法的活产率从 1996 - 2004 年的每移植 21.6% 提高到 2002 - 2004 年的 32.4%；玻璃化冷冻法的活产率和持续怀孕率从 2005 年之前的 29.4% 提高到 2005 年之后的 39%。同时，冻卵后的流产率也呈现出随着活产率提高而下降的趋势。

参考文献：Jain JK, Paulson RJ. Oocyte cryopreservation. Fertil Steril. 2006 Oct;86(4 Suppl):1037-46. doi: 10.1016/j.fertnstert.2006.07.1478. PMID: 17008147.

在人类辅助生殖领域，冷冻保存技术是一项非常重要的技术手段。它包括精子、胚胎和卵母细胞的冷冻保存。研究表明，精子和胚胎的冷冻保存已经成为常规操作，卵母细胞的冷冻保存也正逐渐在临床实践中得到更广泛的应用。

胚胎冷冻保存降低了新鲜胚胎移植的数量，提高了体外受精（IVF）周期的有效性。数据显示，同时进行新鲜胚胎和冷冻胚胎移植的女性，通过使用冷冻胚胎可获得额外 8% 的生育机会。卵母细胞冷冻保存相较于胚胎冷冻有更多优势，比如为因肿瘤治疗或慢性疾病面临生育力丧失风险的女性保存生育能力、用于卵子捐赠以及推迟生育等，还能避免胚胎冷冻所涉及的宗教和伦理道德问题。

冷冻保存技术的基本原理和方法

1. 传统缓慢降温法
   • 冷冻保护剂的作用
     • 在胚胎和卵母细胞的冷冻保存过程中，防止冰晶形成和有毒溶质浓度过高是关键，这两者是导致细胞死亡的主要原因。为了实现这一点，细胞悬浮的冷冻溶液中需要添加冷冻保护剂（CPA）。CPA 分为细胞内 / 膜渗透性（如丙二醇、二甲基亚砜、甘油、乙二醇等）和细胞外 / 膜非渗透性化合物（如蔗糖、海藻糖、葡萄糖、蛋白质、脂蛋白等）。渗透性 CPA 通过渗透梯度置换水分，部分占据细胞内水的位置，而非渗透性 CPA 则增加细胞外渗透压，在冷冻前支持细胞脱水，解冻后防止水分快速进入细胞。
   • 不同阶段的处理
     • 对于人类胚胎和卵母细胞，在缓慢降温前，通常会让其暴露于渗透性和非渗透性 CPA 的混合物中 10 分钟进行脱水。对于早期卵裂阶段的胚胎和卵母细胞，常用低浓度的丙二醇（1.5M）和蔗糖（0.1 - 0.25 - 0.5M），而囊胚阶段的胚胎则常用甘油。以最初成功的小鼠和牛胚胎冷冻保存协议为例，是将胚胎以 - 0.3°C - 0.5°C/min 的缓慢降温速率冷却到 - 80°C - 120°C，但这个过程很长（几个小时）。后来有了改进的方法，如将绵羊和牛胚胎以 0.3°C/min 的速率缓慢冷却到 - 30 - 35°C 后，再浸入液氮中，大大缩短了冷冻过程（1.0 - 1.5 小时）。人类胚胎一般是以 0.3°C/min 的低冷却速率冷却到约 - 30°C - 40°C，然后以 - 50°C/min 的速率增加冷却到 - 80°C - 150°C 后再浸入液氮中。在缓慢降温过程中，手动在 5 到 - 8°C 之间诱导冰晶成核（播种），缓慢冷却到 - 30°C - 40°C 后再快速冷却到 - 196°C 的胚胎 / 卵母细胞，需要在 25°C - 37°C 的温水中快速解冻，然后逐步去除 CPA 进行细胞再水化。
2. 玻璃化（超快速冷冻保存）法
   • 技术原理
     • 玻璃化是一种不同于缓慢降温的冷冻保存方法，它是在低温下通过极端提高粘度使溶液固化，避免冰晶在细胞内和细胞外空间形成。这是通过高浓度的 CPA（4 - 8mol/L）和极高（超快速）的冷却速率实现的。在玻璃化过程中，细胞主要在超快速冷却开始前通过暴露于高浓度的 CPA 进行脱水，以获得玻璃化的细胞内和细胞外状态。但玻璃化过程中 CPA 的高浓度可能对细胞有毒性，不过可以通过混合不同的 CPA 来降低每种 CPA 的相对浓度，并将胚胎 / 卵母细胞暴露于溶液的时间减到最少来控制毒性。
   • 操作要点
     • 用于玻璃化的冷冻溶液由渗透性（如 EG、G、DMSO、PG、乙酰胺等）和非渗透性（如蔗糖、海藻糖等）试剂组成，有些协议还会补充大分子物质如聚乙二醇等。为了提高冷却速率，胚胎 / 卵母细胞玻璃化的溶液体积已被大幅减小（0.1 - 2μL），并开发了特殊的载体系统，如开放式拉伸吸管、Flexipet - 剥脱移液器、Cryotop 等。玻璃化技术操作难度较大，因为胚胎 / 卵母细胞必须在极短时间（<1min）内处理非常浓缩、粘稠且体积小的玻璃化溶液，所以操作人员需要经过良好的培训。

人类胚胎和卵母细胞冷冻保存的实践经验及安全性

1. 胚胎冷冻保存的实践经验
   • 不同阶段的效果
     • 对于人类胚胎冷冻保存，早期卵裂阶段胚胎解冻后至少保留一半初始卵裂球被认为是存活的。在一项大型多中心研究中，14000 个早期卵裂阶段缓慢冷冻和解冻的胚胎中，73% 的胚胎至少有一半初始卵裂球仍然完整，移植后的临床妊娠率和着床率分别为 16% 和 8.4%。对于囊胚冷冻保存，常用甘油和蔗糖的组合作为冷冻溶液，报道的内细胞团和滋养层细胞至少 50% 存活的存活率在 69% - 98% 之间，着床率在 16% - 30% 左右。早期卵裂阶段人类胚胎已成功在多种基于 DMSO、EG 等的溶液中玻璃化，存活率约 60% - 80%，且有多个妊娠 / 分娩案例。囊胚玻璃化常用 EG 和 DMSO 的混合物作为溶液，报道的总体存活率在 70% - 99% 之间，着床率在 20% - 50% 左右。
   • 不同方法的比较
     • 在一些比较研究中，发现玻璃化和缓慢降温在胚胎存活和着床率方面各有优劣。例如，在某些情况下玻璃化的卵裂阶段和囊胚阶段胚胎解冻后存活率较高，但在有经验的群体中，玻璃化并不比缓慢降温有更高的怀孕概率。
2. 卵母细胞冷冻保存的实践经验
   • 不同方法的影响
     • 在缓慢冷冻卵母细胞方面，提高蔗糖浓度（从 0.1M 到 0.3M）可以提高脱水率以及 MII 卵母细胞的存活率和受精率。改变 CPA 的平衡温度、冰晶成核和将胚胎浸入液氮的操作，以及用胆碱替代钠或直接向卵母细胞细胞质中注射蔗糖等方法都能提高卵母细胞的存活率。但缓慢冷却的卵母细胞相对于新鲜对照组发育较慢。在玻璃化卵母细胞方面，常用的玻璃化溶液由渗透性（2.7M EG 和 2.1M DMSO）和非渗透性 CPA（0.5M 蔗糖）组成，改进的玻璃化技术提高了玻璃化人类卵母细胞解冻后的存活率和受精率，与新鲜对照卵母细胞相当。

参考文献：Konc J, Kanyó K, Kriston R, Somoskői B, Cseh S. Cryopreservation of embryos and oocytes in human assisted reproduction. Biomed Res Int. 2014;2014:307268. doi: 10.1155/2014/307268. Epub 2014 Mar 23. PMID: 24779007; PMCID: PMC3980916.

“冻卵”“生育力保存”，昔日只是明星专属，而今已融入众多职场女性中。

研究显示，20-29岁的女性，拥有高达80％的生育力，如关菁教授所言，这一黄金年龄足以战胜多数生育难题，占据绝对优势。而35岁后这个数字下降到52％，45岁女性就只剩5％。

生育，虽非女性必须承担的义务，但却是珍贵的基本权利。我们可以选择暂不行使，我们可以按自己的节奏生活，但生理时钟在无情地流转，我们不能任其消逝。

在面对生理时钟与社会时钟的冲突中，女性如何找到平衡？“冻卵”、“冻胚”似乎成了一条能缓释这种两难局面的路。

去年10月，34岁的小雪来到泰国拉玛3生殖中心，经历的了取卵、受精、养囊、筛查一系列操作后，她成功将3枚混血宝宝胚胎，放进零下196℃的液氮里，冻存了起来。而今年，她计划将再次赴泰国取卵，为未来寻觅到良缘后的生育之路做另一手准备。

对小雪来说——冻胚像是投资了一份‘生育保障’，花钱买几年不必着急的时间

毕竟，爱情能等，生育的黄金期无法逆转

01 清醒的生活家，30岁萌生冻卵念头

小雪说，自己是生殖行业从业者，很早就接触冻卵、冻胚等“前沿”信息，但真正把这项技术和自己相链接，在踏入30岁门槛的瞬间。

当年龄的字头突然跳到了3，感觉很多待办事项被上紧了发条，但又不想因此做出妥协，比如趁早结婚嫁人。

从那时起，冻卵便如同一个精心策划的项目，被她稳稳地纳入人生蓝图，也是从那时起，她开始自觉进入备孕状态，告别加班熬夜，咖啡酒精，细心呵护卵巢健康，期待着“泡泡”们以最好的状态冰封起来。作为摩羯座的她，习惯于未雨绸缪，喜欢在规划中驾驭生活的航向。正是这种深谙生活智慧的态度，让她在30岁的年纪事业有所成，财富也如涓涓细流般积累。

如今在职场摸爬滚打了近十年的她，凭借个人能力她成为了一名现代职场精英。同时在文化艺术领域，凭借个人的兴趣和独特的眼光，她投资了一家文化艺术公司。

生活上，小雪广泛的兴趣，如同调色盘上的斑斓色彩。游泳、健身、攀岩、插花、她多方涉猎；学英语、学乐器，学舞蹈、学字画、学礼仪，她乐此不疲。

她交友广泛，喜欢与志同道合的人分享生活的点滴。金毛、拉布拉多等可爱的小动物，更是她的忠实伙伴，她把自己的生活过得丰富而阳光，她把一个人的日子过得充实有活力。

生活中的井井有条，让她磨砺出坚韧而优雅的性格，能从容面对生活，成为了朋友眼中“自由又独立的样子”；事业上的稳扎稳打，也让她对自己的成长更加认可，也更有底气做自己的决定。

然而，30岁左右的女性也正面临被家人、被社会催婚催生的压力，每逢佳节，家人的催婚声也是不绝于耳，因为在父母和长辈的眼里，即便你事业有成，没有婚姻的人生依然是缺失的。

然而对于婚姻，小雪却有着自己清晰的见解，她不是不婚主义或丁克一族，只是目前没有找到合适的另一半，她觉得自己不需要也没必要，为了迎合别人的期待，违背自己内心，随意进入一段婚姻。

02 渴望成为母亲，是发自内心的呼唤

对于小雪而言，渴望成为母亲，这份来自骨血的召唤，是如此强烈而不可抗拒。

孩子们那般天真烂漫、活泼可爱的模样，使她的生活每一天都充满阳光与欢笑。她不仅喜爱孩子，而且拥有着丰富的养育经验。无论是和小侄女、小外甥女共度时光，还是全心全意照看比自己小12岁的年幼小妹妹，她都展示出对待亲生骨肉般的呵护关爱。

因为从小父母做生意忙碌，从指导功课、辅助高考到帮忙选大学，对于妹妹，小雪几乎扮演了“半个母亲”的角色。她对亲情与血缘的依赖，也根植于她的灵魂深处。

然而，成年后的婚恋经历并不顺遂，历经几段失败的感情，让她深感“生儿育女”的梦想似乎遥遥无期。她开始反思，“结婚生子”虽是社会和传统中的标配，但真正的“成为母亲”似乎与此并无必然之联系。在尚未遇见能与之共同担负育儿责任的伴侣时，她仍对母爱抱有期待。

2018年，小雪的工作让她深入了解到生殖科技的进步，从试管婴儿到冻卵、甚至代孕，现代医学的发展赋予了女性以前所未有的生育选择权。这让她获得力量，相信自己能够在生育这件事上做出独立自主的决定。

随着对辅助生殖行业的研究深入，小雪开始筹划自己的生育之旅，仔细比较、选择适合的国家和机构。尽管对安全性有所顾虑，但她的心中充满希望。

然而，连续三年的疫情、繁忙的工作，以及残余的传统观念影响，使她的计划落地中难免的“束手束脚”。直至2023年，随着一纸宣告，小雪终于下定决心开始这筹备已久的备孕和生育力保存计划。

03 34岁确诊卵巢早衰，冻卵计划加速启动

临近35岁时，生育焦虑来得更猛烈些。因为只要过了35周岁，卵泡的质量直线下降，意味着生育的可能性越来越低。这是不可逆转的生理现象。

身体一向强健的小雪也没有逃离时间的“统治”，甚至被打上了“卵巢早衰”的标签。她说，一直以来都觉得自己身体挺好，但34岁这年，一纸生育力评估报告，却让她如坠冰窟！她的AMH值仅有1.02！雌激素也发出红色警报！她被冷冷地告知，将来生育可能会受影响。

谁能想到一个月经正常的人居然卵巢开始早衰了，之前也没有任何症状，平时工作虽然忙碌点，但每天10点半准时睡觉，吃饭也还算规律，小雪就感觉很冤。

卵巢早衰，意味着卵泡数量会减少，怀孕几率会下降。这让小雪开始怀疑自己的人生节奏是不是有问题，从而加速了她去“冻卵”“冻胚”的决定。

她说，那时的她，很需要“生育力保存”带来的安全感，相当于给自己买一份「生育保险」。

2023年，随着疫情放开，前往泰国进行人工受孕的旅客激增，小雪也将目光投向了泰国成熟的试管婴儿技术。她通过深入的资料搜集，了解到泰国在第三代试管婴儿技术上的显著成就。

在众多选项中，花生医疗拉玛3生殖中心引起了她的关注。花生医疗“中泰一体化”的创新服务模式，允许在国内分院完成促排卵、调理及保胎，而在泰国拉玛3中心完成取卵、胚胎培养与植入，显著减少了在泰国的停留时间，并节约了相应的食宿、出行等系列成本。

小雪坦言，最初她极为担忧此举会影响工作，但“中泰一体化”服务模式极大地方便了像她这样的职场人士。

04单身赴泰，2次取卵成功冻胚3枚

2023年，小雪飞往泰国，前往花生医疗拉玛3生殖中心，于11月和12月先后两次取卵，共获得了17枚卵子。

在选择了一名生物学上的爸爸后，她的卵子成功受精，最终筛查出3枚健康的胚胎宝宝（1枚女孩2枚男孩）。促排、取卵、寻找爱心爸爸、养囊、筛查等各项费用，小雪透露，是一笔不小的开支，但相比于同为试管热门国家的美国来说，周期费用仅为40％，整体下来，性价比更高。

2024年，她计划将再次赴泰国取卵，为未来寻觅到良缘后的生育之路做另一手准备。

对于未来，小雪有着自己明确的规划，如果40岁仍遇不到合适的那个人，就准备移植已冻存的胚胎，正式加入单身妈妈队伍。如果遇到了，则启用冻存的卵子，以拥有一个属于自己和爱人的共同的孩子。

“有人说我不负责任、说我自私，还有人说我剥夺了孩子享受父爱的权利，甚至担心孩子长大之后的心理健康问题等等，对于这些形形色色的不同的声音，我都不在乎，我不是那种很脆弱的人，”小雪说，“将来我也一定能把我的孩子教育的很坚定、内心强大。”

05 中泰一体化，因为省时高效所以选择

在谈及自己赴泰冻胚的经历时，小雪深有感触地指出，“中泰一体化”的服务模式大大简化了整个流程。她在花生医疗的国内机构完成了身体调理和促排卵的前期准备，随后利用短暂假期飞往泰国，完成取卵、胚胎培育及冷冻的全部环节，赴泰时间大约5天左右。

作为生殖领域的业内人士，小雪有着其专业的考量，基于对国内外技术水平的深刻理解，她相信本土的促排方案更适合自身体质，并更加便捷高效。而泰国在胚胎培养上的世界领先地位，则确保了高成功率的冷冻保障。

因为卵巢功能差，促排环节一度让她非常焦虑，但好在她不是1个人，在管治结合的医疗模式下，背后是整个团队为她“孕”筹帷幄。

在国内，从内分泌调理到宫腔环境的全面干预、从西医到中医的综合调理，辅助生殖技术专家亲自为小雪制定了整个促排计划，之后是赴泰取卵。因为进行了促排前恰到好处的调理诊疗，小雪的取卵结果还算出色。

她像往常一样，在小红书上分享笔记（昵称：女超人小雪），得到了多数人的支持和点赞，甚至有不少女生特意来咨询。这是她意料之外的反馈。她才发现，即将超过最佳生育年限时，自己不是唯一感到焦虑的人。

如今，在小雪的激励下，很多姐妹也纷纷迈出了生育力保护的征程。

正如小雪及同行人“坚定选择”所体现出的信念：年龄应仅是时光的注脚，生育，永远是人生旅途中一段美好旅程的起点，而非障碍。