近日门诊来了一位女患者，30岁左右，自述每次来月经前几天整个人不正常，容易情绪激动，和老公吵架，打孩子，总觉得燥热，这种情况持续了两年多，症起生产之后，只有经前几天出现这些症状，月经一来就正常了。

 

得病期间，每次发作起来和亲戚吵架，最后吵到大家都不敢去她家，家人都说她可能有精神病，差点送去西医院开镇静类药物。因害怕吃西药于是来寻求中医帮助。在诊脉看舌后老师开了方子，主要活血、化瘀、清热，因第二次来就诊时还未至经期，症状不显，但自述觉得没以前燥热了。

 

 

可能我们生活中遇见的并没有这么夸张，大部分人只是经前或经期情绪不稳，容易悲伤或莫名烦躁，倒不至于时时欲哭或打人毁物。这些表现中医诊断为“经行情志异常”，关于本病的记载始见于《陈素庵妇科补解》。

 

分析本病的病机一般有三种情况：

 

心血不足

 

中医讲“心主神明”，从狭义来说神指人的思维、意识、情感及性格等精神活动。而神又与血有着密不可分的关系，《灵枢》说“血者，神气也”，心血充足则能化神养神，同时心神清明又能调控心血正常运行。若是素体心血偏虚或劳倦伤脾则导致血少，而经期气血下注冲任二脉，不能滋养心脾，神失所养，则出现精神异常，多表现为悲伤易哭，情绪低落。

 

 

肝经郁热

 

在脏腑学说中认为“肝主疏泄”，而女子月经来潮与它的疏泄功能息息相关，故又有“女子以肝为先天”之说。若肝气郁结，疏泄不畅，郁而化热，从而上扰心神。这种情况常常表现为烦躁易怒，打人毁物。

 

痰火上扰

有人素体痰湿内盛，或情志不畅，容易导致肝木乘脾土，脾虚又生湿，湿聚为痰，中医讲“百病皆由痰作祟”“怪病多痰”，痰积日久易化热，痰火上扰心窍，导致情志失常，多表现为精神狂躁，烦乱不安。

 

其实临床上大多数都是以某一病机为主，兼有其它，故而辨证论治也有主有次。经期情志异常与平素体质有着极大的关系，同时也离不开自己的调节，尽量在经前经期放松心情，规律生活，可以缓解某些症状。如果像文章一开始所讲的那位患者那么严重的话建议及时就医，不可大意。

 

 

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归根究底，“吵架”实质上是为了解决问题以及表达需求。

不同的人有不同的思维方式。

有一类人是解决问题型。在碰到问题时，他们想的是：这件事是什么，我能怎么解决，再提出自己的解决方法。

还有一类人是情绪感知型。先希望对方能安抚自己的情绪，接着才是解决矛盾。

两种模式产生冲突，双方都只是在意自己的需求。其中一方以列举对方的错误和缺点开始谈话，而另一方开启攻击和自我保护模式。

这场“谈话”偏离原始目的，变成一场“不是你死就是我活”的输赢拉锯战，双方焦灼于表达不满，互相攻击，很难达到真正的沟通目的。

心理学家汉斯赛利说：“我们渴望获得认同的欲望，和我们畏惧斥责的一样多。”

举个例子，在我们小的时候，被父母要求做一件事时，如果父母用的是带有指责否定意味的话，势必会引起我们强烈的反感叛逆心理。

如“你整天就是好吃懒做的，能不能帮我分担一下？都不知道帮帮忙吗？你看别人家的小明多孝顺。”

或者，“你能不能不要添乱？爸妈每天那么忙你就不知道体谅一下吗？“

同样，在伴侣沟通时，总是以指责开端：

“你怎么不早点回家？都没人做饭！”

“游戏有那么好玩吗？天天玩，什么都不干。”

这些话中带有的浓郁否定色彩，只会开启 ta 们的心理防御机制。

人都是厌恶这种指责的，心理的保护伞会瞬间启动，引起争吵和抵触。

心理学家约翰戈特曼把伴侣分成两类：一种叫成功型伴侣（Master），一种叫灾难型伴侣（Disaster）。

成功型伴侣，会主动发现伴侣身上值得欣赏的优点，会在相处中察觉值得感谢的部分，也会有意识建立起互相尊重和欣赏的习惯。

而灾难型伴侣，通常不会对伴侣的情绪做出积极回应，甚至还会主动找到伴侣身上的错误，习惯性表达指责和批评。

在失败的沟通中，有大多都是灾难型伴侣。

再来聊一聊争吵当中的沉默

我们都以为，沉默是拒绝对方沟通的请求，实际上，有时的沉默，也可能是想要发起沟通，但遭了拒绝。

在亲密关系中，伴侣不一定会直接告诉你“我们来谈谈吧”，也可能是行动或是侧面性话题暗示想要沟通，如“你觉得这对电视剧里的夫妻怎么样？”

但是，当 ta 们的尝试被我们忽略或是拒绝，ta 们可能就会关闭自己想要开口的内心。在我们提出明示性的沟通诉求时，反而保持了沉默。

心理学上，这种场景称之为“滑动门时刻”（sliding door moment）。

即当一个人表达出连接的需要时，另一个人的反应可以是滑开“滑动门”并走过去，也可以是关上“滑动门”并转身离开。

当 ta 说出“我认为这个电视里这对夫妻的问题是沟通不畅”时，如果你的回答是“为什么你会这么认为？“，这是在引导对方表达，这种回应叫做面向（turning towards）。

而如果，你的回答是“好好看电视别说话”，或者“你还说别人，自己都做不好”之类的，这是在打断对方的表达，这种回应叫做背向（turning away from）。

经常关闭“滑动门”，会让对方慢慢不再愿意主动吐露自己的真实内心，同时会让对方觉得自己的想法和表达不被重视，从而演变成越来越多的沉默。

最后再聊一聊，怎么样争吵才算结束了

很多人都特别在意争吵的输赢。

如果太过于只想着“赢得胜利”，就会偏离原始目的——解决问题。

夫妻沟通中的“输赢”，从来就不能和爱挂钩，你要知道，站在你旁边这个人，不是你的对方辩友，而是你的终身伴侣。

吵架的本质，其实是寻求共鸣。

如果把吵架变成辩论，就是在回避对方的情绪和需求，会让对方开启筑墙（stonewalling）行为，也就是逃避或者直接沉默。

当对方说“你刚刚说的这些话太伤人”时，你的回应是“这是我的错吗？你怎么那么玻璃心？”。

这场沟通就变成了一场互不理解的拉锯战，长此以往只会让对方心里的“墙”越来越高。

在亲密关系里，你总想着争得胜利，就有可能输掉一些什么。

正是因为不管怎么沟通，你都只想占上风，从而忽视、误解了对方的表达和内心。

久而久之，对方会开启冷处理，也就是冷暴力。

这其实是茫然的一种体现，因为对方实在不知道应该怎么做了，对方认为自己被伤害了，所以也选择了用“沉默”“冷暴力”这把武器。

而冷暴力和沉默，可是亲密关系里的一把大杀器，我们不能放纵它自由生长。

学会吵架的人，才可以幸福。

我们需要审视自己沟通的目的，更多去使用“我们”而不是“我认为，我感觉”。

如果想让 ta 接纳你，你首先要做的，是让 ta 感觉你们两人是共同体，接下来也不是对 ta 的批判大会。

当对方开始接纳，并且缓和了“冷暴力”的态度时，不要说话，听 ta 说，毕竟前面我们也宣泄那么久情绪了嘛，你说是吧？

最后，不要带有任何攻击性的方式和伴侣沟通，也不必为他贴标签，直白地表达你的情感诉求。

例如，想让对方多陪陪你，就实事求事告诉对方“明天晚上或者后天晚上我们出去吃饭，然后去公园逛一下吧？”

就像克尔凯郭尔在《爱的作为》中说的：

要去爱彼此的人性。

真爱，不会因为他人的缺点，而不去拥抱他人，仿佛高高在上。

相反，当爱人出现了过错，人们应该更牢靠、更紧密地相拥，为了克服那些不足

 

 

 

 

 

 

双相障碍是以情绪低落与兴奋激惹交替发作的一组情感障碍综合征，伴有躯体症状、睡眠改变，以及认知功能缺失等表现，如果不规范治疗，会导致反复发作，致使整体社会功能受损害。通常双相障碍在急性期首选药物治疗，心境稳定剂是必要的一线选择，其次可以考虑合并使用二代抗精神病药物，如奥氮平、喹硫平、鲁拉西酮等药物，当然，严重持续的抑郁发作也需要使用抗抑郁剂。

然而，当患者进入巩固维持期时，需要根据具体的症状和个人需求，增加非药物干预。一方面，加强了治疗效果，避免复发，另一方面，也可以对心理状和社会功能、认知功能等给与训练，促进社会和人际适应、职业和学习能力的提升。笔者一一介绍一些非药物治疗模式。

1、物理治疗

目前常见的物理治疗如经颅磁刺激治疗（rTMS）在临床开展非常普及，可以有效改善患者的焦虑抑郁情绪、失眠、躯体化症状。很多患者虽然度过急性期，处于巩固期，但仍有一些残留症状如睡眠质量不佳、心烦焦虑和身体不适感存在，在维持原有药物治疗的同时，给与 rTMS 辅助治疗，可以有效改善这些残留的症状，通常 20 次以上的治疗频次就能使这些症状逐步改善。

2、心理治疗

毫无疑问专业的心理治疗，如认知行为治疗（CBT），人际关系疗法（IPT）、家庭结构治疗等多种模式逐渐被很多双相障碍患者朋友接纳。那么具有哪些症状可以接受心理治疗呢？通常在稳定期，存在的负性认知思维模式，如总是感觉自己不如别人、自责、否定自我等负性认知可以接受 CBT 心理治疗，此外，人际关系及适应困难、婚姻家庭冲突、职业压力等方面的问题都可以接受以上心理治疗，通常 12 次左右可以缓解大部分心理问题。

3、认知训练

认知训练是最近几年开始受到关注的治疗干预手段，主要通过专业的神经认知训练（FR）和社会认知训练（SCIT），旨在改善患者的神经认知缺陷，如注意力难以集中，记忆力差，好忘事，工作和学习效率地下，思维逻辑能力下降等多种神经认知能力，通过 20 周的训练，可以有效改善双相障碍患者的上述认知功能问题。此外，针对人际关系冲突，人际敏感、情景误解、情绪失控等问题，给与社会认知和互动整合训练，经过 8 周的小组训练，也可以显著改善这些问题。总之，认知训练对于即将回归社会、踏入职场的朋友有着药物不能替代的效果。

4、体能训练

运动疗法对患者的动力不足、欲望低下、焦虑失眠、抑郁和神经认知缺陷都有很好的疗效，多项国际研究证实，球类运动、舞蹈样运动、骑车、游泳依次有不同的改善焦虑、抑郁和动力力不足的效能，每次运动 30 分钟，每周 5 天运动，坚持 1-3 月，效果卓著。

当然，还有其他模式，如音乐治疗、绘画治疗等也是建议的形式，无论哪一种治疗模式，共同的一点就是需要持之以恒，否则，都不会体验到最终疗效，所谓笑到最后的就是那个坚持下来的人！让我们行动起来吧！

在心理门诊经常会遇到很多有自伤行为的人群，其中大部分是女性。

美丽的装扮下藏着一颗“玻璃心”，长长的衣袖下遮盖的是密密麻麻刀割的伤痕。

他们大都会有人际关系不良，内心缺乏安全感，很难相信他人的特点。情绪也极其不稳定，前一刻还兴高采烈，下一秒就可能暴跳如雷。他们总是害怕被他人“抛弃”，总会设置一些难题试探自己与别人的人际关系是否稳定。周围的人与其相处过程中总有一种“冰火两重天”的感觉，为此十分辛苦。

小米（化名）第一次来心理门诊就诊，来的原因是不想上学，老师认为其平时行为奇怪让家长带她看看心理医生。

小米说不愿上学是感觉处理不好与同学及与老师的关系。她回忆说，最初是因为跟同桌闹着玩，用笔在对方身上画，闹着闹着就觉得对方有些过分，但自己一向脾气好就忍着，后来感觉忍不住了，就从书包里拿出削笔刀扎对方的腿。老师知道后把她叫到办公室批评。老师认为一个女孩子不应该有这样的行为，而且被叫到办公室也没哭，非常不正常，所以就说她有“心理疾病”。小米说在班级里根本没有知心朋友，为了跟同学玩常常迎合他人，委曲求全，每日也很辛苦。

父母在她很小的时候就离异，她跟爷爷和爸爸生活在一起。爸爸时常饮酒，喝醉了有时会打她，不喝酒的时候也很少关心她。平时很少能看到妈妈，并且爷爷、爸爸时常辱骂妈妈，说妈妈不好，不让她与妈妈联系。她感到自己非常的孤独，这个世界上好像没人能理解她，没人需要她，自己非常的多余。因为孤独，害怕被别人抛弃，所以要讨好亲人，讨好同学。然而过度的讨好并没有换来知心好友，反而是同学的欺负与看不起。对父亲的讨好仍然换来的是平时的冷漠与醉酒后的殴打。小米时常感觉自己的情绪波动较大，有的时候挺开心的，但大多数时间是不开心，寂寞，孤独的，时常感觉控制不住自己的脾气，不知道为什么就发脾气，以至于过后又要低三下四的去讨好别人，赔礼道歉。当她内心无助，绝望，烦躁时，就会忍不住用刀割自己的手臂。

她大方地向我展示她的左前臂，密密麻麻的都是刀割的伤痕，有的是新伤刚结痂，有的则已是瘢痕。她说每次特别难受的时候唯有疼痛才能让自己冷静下来，知道自己是真实存在的。我问她，“这么明显的伤痕，爸爸没发现吗？”。她笑一笑说：“爸爸看见了，我还正想怎么撒谎说这个事情，我爸自己就说这是猫抓的”。小米笑容的背后透露出对父亲的失望与伤心。

小米描述自己还有一种很奇怪的现象，感觉旁边有人看着自己，在自己特别伤心，孤独，难受的时候能感觉到这个人抱着自己，尤其是躺在床上这种感觉更强烈。她说如果这个人是真的就好了，时常看着我，关注着我，抱着我，安慰着我，可我知道这是不真实的可我需要这种感觉。

在美国《精神障碍诊断与统计手册第五版》（DSM-5）中将小米类似情况的人群归纳为“边缘型人格障碍”。具体为一种人际关系、自我形象和情感不稳定以及显著冲动的普遍模式。表现为下列 9 项症状中的 5 项（或更多）症状即可诊断。

• 极力避免真正的或想象出来的被遗弃。
• 一种不稳定的、紧张的人际关系模式，以极端理想化和极端贬低之间的交替变动为特征。
• 身份紊乱：显著的持续而不稳定的自我形象或自我感觉。
• 至少在两个方面有潜在的自我损伤的冲动性（例如：消费、性行为、物质滥用、鲁莽驾驶、暴食）。
• 反复发生自杀行为、自杀姿态或威胁，或自残行为。
• 由于显著的心境反应所致的情感不稳定（例如，强烈的发作性的烦躁，易激惹或是焦虑，通常持续几个小时，很少超过几天）。
• 慢性的空虚感。
• 不恰当的强烈愤怒或难以控制发怒（例如，经常发脾气，持续发怒，重复性斗殴）。
• 短暂的应激有关的偏执观念或严重的分裂症状。

边缘型人格障碍个体可能会在目标即将实现时出现自我毁坏的模式（例加，毕业即将来临时辍学；在讨论治疗进行得如何好之后出现严重退行；当关系可以明确地继续进行时将它破坏）。有些个体在应激下可以发展出精神病样症状（例如幻觉、体像扭曲、牵连观念、临睡前的幻觉现象）。比起人际关系，该障碍个体可能对过渡性客体（例如，宠物或某种无生命的物件）感到更加安全。该障碍个体，尤其是那些与抑郁障碍或物质滥用障碍共病的个体，可能因自杀而过早死亡。自虐行为或自杀未遂可能导致该障碍个体的躯体残疾。反复失业、教育中断、分居或离婚很普遍。边缘型人格障碍可以引发家庭暴力、工作效率下降、性瘾、赌博、自残、犯罪等等。躯体和性虐待、忽视、敌意的冲突、早年父母丧失，在边缘型人格障碍个体的童年时期较常见。边缘型人格障碍还饱受其他心理疾病的困扰，常常与抑郁和双相障碍、物质使用障碍、进食障碍（特别是神经性贪食）、创伤性应激障碍以及注意缺陷/多动障碍等心理疾病共病。

边缘型人格障碍人群内心的苦楚，身心的煎熬鲜为人知。公众对“边缘型人格障碍”没有足够的理解，这一人群遭到长期的忽视。但该障碍对患者本人及他人的影响，破坏性因未对该疾病的认识也未及时得到干预与解决而持续存在并加重。倘若您遇到类似的境遇，或您发现您的孩子身上有不明伤痕，淤青时请到心理门诊就诊寻求解决的办法。

该文中的小米，经过药物及心理治疗自伤行为已消失，情绪也有改善，但如何让她相信他人，建立稳定的人际关系，内心有安全感，不再怕被抛弃仍需要更长时间的心理治疗来修复和改善。

冻卵，受到了越来越多的关注。但你对冻卵女性了解有多少？她们年龄多大？冻卵后她们又如何使用的？通过1篇荟萃分析我们来一起揭秘。

一、研究方法

研究人员按照系统综述和荟萃分析的首选报告项目（PRISMA）建议进行了系统综述。他们搜索了 PubMed、Scopus 和 Web of Science 从建库到 2021 年 1 月的文献，对发表日期没有限制。纳入的研究需为英文，且研究了计划性冻卵的使用者或潜在使用者的特征、最初信息来源以及卵子处置情况。提取的数据通过主题分析进行分析，纳入研究的方法学质量使用 QualSyst 标准进行评估。

二、研究结果

1. 研究筛选情况
   • 最初检索到 1074 条记录，其中 29 项研究符合纳入标准，包括 12 项定性研究和 17 项定量研究。调查的回复率在 38% - 85% 之间。
2. 女性特征
   • 计划性冻卵的使用者或潜在使用者大多为单身、受过高等教育、有工作，平均年龄为 37 岁。
3. 信息来源
   • 媒体和朋友是计划性冻卵最初知识的最常见来源，而健康专业人员则是较不常见的来源。
4. 卵子使用情况
   • 大多数计划性冻卵者没有尝试使用冷冻卵子怀孕，但她们并不后悔进行了该过程。

三、讨论与启示

1. 人口特征与卵子使用
   • 计划性冻卵的大多数使用者或潜在使用者具有特定的人口统计学特征，并且最终大多没有使用她们冷冻保存的卵子。这可能是由于多种原因，比如在冻卵后的生活中，她们的生育计划发生了改变，或者虽然有生育的想法但尚未尝试使用冷冻卵子。
2. 卵子处置的选择
   • 对于未使用的卵子，存在多种处置方式。可以选择丢弃，这可能是因为女性认为自己不再需要这些卵子，或者缺乏合适的使用途径。也可以选择捐赠给其他女性，为那些有生育困难的女性提供帮助。此外，还可以捐赠给研究机构，用于相关的科学研究，以推动生育医学的发展。
3. 对健康专业人员的指导意义
   • 了解计划性冻卵潜在使用者的主要特征，健康专业人员可以更加主动地宣传正确的冻卵知识，包括冻卵的风险、成功率以及后续可能面临的问题等。同时，在咨询过程中，也可以根据女性的年龄、婚姻状况和生育计划等因素，提供更加个性化的建议，帮助她们做出更有效的决策。

参考来源：Giannopapa M, Sakellaridi A, Pana A, Velonaki VS. Women Electing Oocyte Cryopreservation: Characteristics, Information Sources, and Oocyte Disposition: A Systematic Review. J Midwifery Womens Health. 2022 Mar;67(2):178-201. doi: 10.1111/jmwh.13332. Epub 2022 Feb 13. PMID: 35156301.

原始卵泡位于卵巢皮质中，处于静止状态。其数量在出生时就已确定（每个卵巢大约 60 万到 100 万个），并在儿童期和整个生育期持续逐渐减少，因为原始卵泡会被募集并离开静止状态。

大多数原始卵泡在初次募集后发生闭锁，无法达到窦状卵泡阶段，只有少数能继续生长直至排卵，在生育期大约排卵 450 次左右，只有极少数卵泡能发育成有受精能力的卵子。当原始卵泡几乎耗尽，只剩下大约 1000 个原始卵泡时，就会导致绝经。

随着女性生育观念的转变以及医学技术的飞速发展，冻卵技术作为一种生育力保存的手段，正逐渐走进大众的视野。这一技术为女性在面临生育挑战时提供了一种可能的解决方案，无论是因为职业发展、个人生活规划，还是由于疾病治疗等原因导致的生育延迟或生育风险增加。

一、冻卵技术的原理与方法

冻卵技术的核心原理是在极低的温度下保存卵子，使其代谢活动几乎停止，从而延长卵子的存活时间。目前主要有两种常见的冻卵方法：慢冻法和玻璃化冷冻法。

慢冻法是一种较为传统的方法，它通过逐步降低温度，让卵子在这个过程中逐渐适应低温环境。在这个过程中，会使用一些冷冻保护剂来减少冰晶的形成，因为冰晶可能会对卵子的结构造成损伤。具体来说，卵子首先在含有一定浓度冷冻保护剂的溶液中进行预处理，然后以相对缓慢的速度降温，经过多个阶段的温度调控，最终将卵子储存于液氮中，温度可达 -196°C。

玻璃化冷冻法则是一种更为先进的技术，它能够在更短的时间内实现卵子的冷冻。这种方法使用了更高浓度的冷冻保护剂，并且通过极快的冷却速度，使卵子在瞬间从液态转变为一种类似玻璃的固态，从而避免了冰晶的形成。玻璃化冷冻法在保护卵子的结构和功能方面具有一定的优势，因此近年来受到了越来越多的关注和应用。

二、冻卵技术的适用人群与临床应用

1. 癌症患者的生育力保存 对于许多癌症患者，尤其是年轻女性，化疗、放疗等治疗手段可能会对卵巢功能造成不可逆的损害，导致生育能力丧失。冻卵技术为这些患者提供了在接受治疗前保存生育能力的机会。例如，在一些血液系统癌症或生殖系统癌症的治疗中，医生会建议患者在开始治疗前考虑冻卵。通过采集卵子并进行冷冻保存，患者在治愈癌症后，如果有生育的意愿，就有可能使用这些冷冻的卵子尝试受孕。
2. 延迟生育的女性 随着社会的发展，越来越多的女性选择在事业有成之后再考虑生育问题。然而，女性的生育能力会随着年龄的增长而逐渐下降，尤其是在 35 岁之后，这种下降趋势更为明显。冻卵技术为这些希望延迟生育的女性提供了一种保障。她们可以在年轻、生育能力较强的时候将卵子冷冻保存，等到合适的时机再尝试受孕。

三、冻卵技术的临床效果与影响因素

1. 卵子的存活率和受精率 冻卵技术的临床效果受到多种因素的影响。从卵子的存活率和受精率来看，不同的研究报道结果有所差异。一般来说，玻璃化冷冻法在卵子存活率和受精率方面可能表现出一定的优势。一些研究显示，玻璃化冷冻法的卵子存活率可达 90% 以上，受精率也在 70% - 90% 左右；而慢冻法的卵子存活率在 50% - 70% 左右，受精率在 60% - 70% 左右。然而，这些数据并不是绝对的，实际的存活率和受精率还会受到卵子本身的质量、冷冻保护剂的使用、冷冻和解冻的操作过程等多种因素的影响。
2. 怀孕率和活产率 冻卵后的怀孕率和活产率也是衡量技术效果的重要指标。随着技术的不断发展，冻卵后的怀孕率和活产率也在逐步提高。例如，慢冻法的活产率从早期的较低水平逐渐上升，从 1996 - 2004 年的每移植 21.6% 提高到 20，02 - 2004 年的 32.4%；玻璃化冷冻法的活产率和持续怀孕率从 2004 年之前的 29.4% 提高到 2004 年之后的 39%。但需要注意的是，怀孕率和活产率还与女性的年龄、身体状况、受孕环境等多种因素密切相关。

冻卵技术作为一种新兴的生育力保存手段，为女性的生育选择提供了更多的可能性。然而，我们也应该清醒地认识到，这项技术仍然处于不断发展和完善的过程中，面临着诸多技术挑战和伦理法律问题。只有通过不断的研究和探索，才能使冻卵技术更好地服务于女性的生育健康，为更多女性实现生育梦想提供有力的支持。

参考文献：Cacciottola L, Donnez J, Dolmans MM. Ovarian tissue and oocyte cryopreservation prior to iatrogenic premature ovarian insufficiency. Best Pract Res Clin Obstet Gynaecol. 2022 May;81:119-133. doi: 10.1016/j.bpobgyn.2021.09.010. Epub 2021 Nov 15. PMID: 34887172.

在当今社会，女性面临着多种可能影响生育能力的因素，如癌症治疗、延迟生育等。因此，生育力保存成为了一个重要的研究领域，而冻卵技术作为其中的一种方法，正逐渐受到关注。其目的在于为面临生育风险的女性提供一种保存生育能力的选择，以便在未来需要时能够实现生育梦想。

冻卵技术的原理

为了长期保存细胞的活性，需要将细胞置于极低的温度下，使其进入一种类似于 “暂停生命活动” 的状态。对于哺乳动物细胞来说，通常使用的储存温度是 -196°C（液氮的温度）。在这个温度下，水呈固态，生物反应停止，对冻存细胞的主要威胁被认为是背景辐射对 DNA 造成的损伤。

然而，冻卵过程中最关键的是要避免在温度变化过程中对卵子造成损伤。当水冷却到冰点以下时会形成冰晶，冰晶的体积比液态水大，会对细胞内的细胞器造成压力和剪切力，导致细胞受损。因此，避免冰晶形成是成功冻卵的首要目标。此外，随着水的冻结，溶质被排除在固体之外，会使剩余未冻结溶液的溶质浓度升高，对细胞内蛋白质产生毒性，避免这种溶液效应是第二个目标。在解冻过程中，如果升温缓慢，会有自由水解冻和再结晶的危险，而快速升温则可能导致细胞外渗透压突然下降，引起自由水快速流入细胞，造成细胞肿胀和损伤，即渗透压冲击，避免这种情况是第三个目标。

为了实现这些目标，所有成功的冻卵方法都使用了一种叫做冷冻保护剂的化学物质。冷冻保护剂分为渗透性和非渗透性两类。渗透性冷冻保护剂是小分子物质，能够穿透细胞膜，与水分子形成氢键，防止冰晶形成，并在一定浓度下可使水形成玻璃化状态（一种固态但不膨胀的状态）。常用的渗透性冷冻保护剂有丙二醇（PROH）等。非渗透性冷冻保护剂则留在细胞外，通过从细胞内吸取自由水来使细胞内空间脱水，从而增加渗透性冷冻保护剂在细胞内的浓度，进一步协助防止冰晶形成。在解冻过程中，非渗透性冷冻保护剂还可以防止因细胞内冷冻保护剂不能快速扩散出去而导致的渗透压冲击，常用的非渗透性冷冻保护剂有蔗糖等。

冻卵的方法

1. 慢冻法（Slow - Freeze）
   • 慢冻法在卵子仍处于代谢状态时使用较低的初始冷冻保护剂浓度，以降低毒性。冷冻保护剂通常在室温下添加，然后温度逐渐降低（约 2°C/min）到 -6°C 的播种温度。在这个温度下，通过用冰冷的器械触碰冻存容器的外部，引入一个小冰晶作为种子，诱导溶液中的冰晶形成。然后溶液在这个温度下保持一段时间（如 10 - 30 分钟）以达到平衡，之后温度再逐渐降低到 -32°C。在这个过程中，冰晶在细胞外介质中逐渐生长，冷冻保护剂浓度逐渐增加，特别是在细胞内空间，通过非渗透性冷冻保护剂进一步脱水。最后将冷冻容器投入液氮中。
   • 在解冻时，为了防止冰晶再结晶，需要快速升温，但要注意避免渗透性冷冻保护剂在细胞内高浓度引起的渗透压冲击，因此需要使用额外的非渗透性冷冻保护剂。随着渗透性冷冻保护剂逐渐从卵子中扩散出来，非渗透性冷冻保护剂的浓度逐渐降低，直到卵子被放回标准培养基中。
2. 快速冷冻法（Vitrification）
   • 快速冷冻法（玻璃化冷冻）在室温下向细胞中添加高浓度的渗透性冷冻保护剂，由于这种高浓度的冷冻保护剂毒性较大，卵子不能在这个温度下长时间停留。经过短暂的平衡后，卵子直接投入液氮中。为了进一步防止冰晶形成，使用极快的冷却速度。在解冻时，也需要极快的升温速度以防止冰晶再结晶。

冻卵技术的临床应用

1. 癌症患者的生育力保存
   • 对于新诊断出癌症且面临绝育治疗的女性来说，冻卵是一种保存生育能力的方法。化疗和放疗等癌症治疗方法可能会导致卵巢功能衰竭，而冻卵可以在治疗前进行。例如，卵巢皮质含有大量原始卵泡，可以通过腹腔镜采集卵巢皮质，然后进行冻存。或者也可以采集处于生发泡阶段的卵子进行冻存，尽管生发泡卵子的体外成熟技术还不太可靠。
   • 在癌症患者中使用冻卵技术也存在一些问题，如刺激卵泡和采集卵子所需的时间可能会延迟癌症治疗，而且对于患有全身性或播散性恶性肿瘤的患者，移植冻存的卵巢组织需要谨慎，因为可能存在残留的恶性细胞。
2. 延迟生育
   • 随着社会的发展，越来越多的女性选择延迟生育。由于年龄的增长会导致生育能力下降，冻卵为这些女性提供了一种在年轻时保存卵子的方法，以便在未来想要生育时使用。然而，目前对于冻卵技术在延迟生育方面的应用，还缺乏长期的数据，例如需要冻存多少卵子才能实现满意的怀孕率还不确定。
3. 伦理问题及其他应用
   • 冻卵技术为那些反对胚胎冷冻保存的夫妇提供了一种选择，也可以用于一些胚胎冷冻保存不合法的国家。此外，冻卵还可以用于卵子捐赠，通过冻存捐赠者的卵子，可以解决传统卵子捐赠中存在的一些问题，如捐赠者的可用性、成本、同步捐赠者和接受者的日程安排等。

冻卵技术的临床结果

1. 存活率和受精率
   • 不同的研究报道了不同的卵子存活率和受精率。例如，一些研究使用慢冻法报道的卵子存活率在 50% - 70% 左右，受精率 60% - 70% 左右；而使用玻璃化冷冻法报道的卵子存活率和受精率可能更高，如一些研究中卵子存活率可达 90% 以上，受精率也在 70% - 90% 左右。
2. 怀孕率和活产率
   • 从临床结果来看，冻卵后的怀孕率和活产率也在不断提高。慢冻法的活产率从 1996 - 2004 年的每移植 21.6% 提高到 2002 - 2004 年的 32.4%；玻璃化冷冻法的活产率和持续怀孕率从 2005 年之前的 29.4% 提高到 2005 年之后的 39%。同时，冻卵后的流产率也呈现出随着活产率提高而下降的趋势。

参考文献：Jain JK, Paulson RJ. Oocyte cryopreservation. Fertil Steril. 2006 Oct;86(4 Suppl):1037-46. doi: 10.1016/j.fertnstert.2006.07.1478. PMID: 17008147.

在人类辅助生殖领域，冷冻保存技术是一项非常重要的技术手段。它包括精子、胚胎和卵母细胞的冷冻保存。研究表明，精子和胚胎的冷冻保存已经成为常规操作，卵母细胞的冷冻保存也正逐渐在临床实践中得到更广泛的应用。

胚胎冷冻保存降低了新鲜胚胎移植的数量，提高了体外受精（IVF）周期的有效性。数据显示，同时进行新鲜胚胎和冷冻胚胎移植的女性，通过使用冷冻胚胎可获得额外 8% 的生育机会。卵母细胞冷冻保存相较于胚胎冷冻有更多优势，比如为因肿瘤治疗或慢性疾病面临生育力丧失风险的女性保存生育能力、用于卵子捐赠以及推迟生育等，还能避免胚胎冷冻所涉及的宗教和伦理道德问题。

冷冻保存技术的基本原理和方法

1. 传统缓慢降温法
   • 冷冻保护剂的作用
     • 在胚胎和卵母细胞的冷冻保存过程中，防止冰晶形成和有毒溶质浓度过高是关键，这两者是导致细胞死亡的主要原因。为了实现这一点，细胞悬浮的冷冻溶液中需要添加冷冻保护剂（CPA）。CPA 分为细胞内 / 膜渗透性（如丙二醇、二甲基亚砜、甘油、乙二醇等）和细胞外 / 膜非渗透性化合物（如蔗糖、海藻糖、葡萄糖、蛋白质、脂蛋白等）。渗透性 CPA 通过渗透梯度置换水分，部分占据细胞内水的位置，而非渗透性 CPA 则增加细胞外渗透压，在冷冻前支持细胞脱水，解冻后防止水分快速进入细胞。
   • 不同阶段的处理
     • 对于人类胚胎和卵母细胞，在缓慢降温前，通常会让其暴露于渗透性和非渗透性 CPA 的混合物中 10 分钟进行脱水。对于早期卵裂阶段的胚胎和卵母细胞，常用低浓度的丙二醇（1.5M）和蔗糖（0.1 - 0.25 - 0.5M），而囊胚阶段的胚胎则常用甘油。以最初成功的小鼠和牛胚胎冷冻保存协议为例，是将胚胎以 - 0.3°C - 0.5°C/min 的缓慢降温速率冷却到 - 80°C - 120°C，但这个过程很长（几个小时）。后来有了改进的方法，如将绵羊和牛胚胎以 0.3°C/min 的速率缓慢冷却到 - 30 - 35°C 后，再浸入液氮中，大大缩短了冷冻过程（1.0 - 1.5 小时）。人类胚胎一般是以 0.3°C/min 的低冷却速率冷却到约 - 30°C - 40°C，然后以 - 50°C/min 的速率增加冷却到 - 80°C - 150°C 后再浸入液氮中。在缓慢降温过程中，手动在 5 到 - 8°C 之间诱导冰晶成核（播种），缓慢冷却到 - 30°C - 40°C 后再快速冷却到 - 196°C 的胚胎 / 卵母细胞，需要在 25°C - 37°C 的温水中快速解冻，然后逐步去除 CPA 进行细胞再水化。
2. 玻璃化（超快速冷冻保存）法
   • 技术原理
     • 玻璃化是一种不同于缓慢降温的冷冻保存方法，它是在低温下通过极端提高粘度使溶液固化，避免冰晶在细胞内和细胞外空间形成。这是通过高浓度的 CPA（4 - 8mol/L）和极高（超快速）的冷却速率实现的。在玻璃化过程中，细胞主要在超快速冷却开始前通过暴露于高浓度的 CPA 进行脱水，以获得玻璃化的细胞内和细胞外状态。但玻璃化过程中 CPA 的高浓度可能对细胞有毒性，不过可以通过混合不同的 CPA 来降低每种 CPA 的相对浓度，并将胚胎 / 卵母细胞暴露于溶液的时间减到最少来控制毒性。
   • 操作要点
     • 用于玻璃化的冷冻溶液由渗透性（如 EG、G、DMSO、PG、乙酰胺等）和非渗透性（如蔗糖、海藻糖等）试剂组成，有些协议还会补充大分子物质如聚乙二醇等。为了提高冷却速率，胚胎 / 卵母细胞玻璃化的溶液体积已被大幅减小（0.1 - 2μL），并开发了特殊的载体系统，如开放式拉伸吸管、Flexipet - 剥脱移液器、Cryotop 等。玻璃化技术操作难度较大，因为胚胎 / 卵母细胞必须在极短时间（<1min）内处理非常浓缩、粘稠且体积小的玻璃化溶液，所以操作人员需要经过良好的培训。

人类胚胎和卵母细胞冷冻保存的实践经验及安全性

1. 胚胎冷冻保存的实践经验
   • 不同阶段的效果
     • 对于人类胚胎冷冻保存，早期卵裂阶段胚胎解冻后至少保留一半初始卵裂球被认为是存活的。在一项大型多中心研究中，14000 个早期卵裂阶段缓慢冷冻和解冻的胚胎中，73% 的胚胎至少有一半初始卵裂球仍然完整，移植后的临床妊娠率和着床率分别为 16% 和 8.4%。对于囊胚冷冻保存，常用甘油和蔗糖的组合作为冷冻溶液，报道的内细胞团和滋养层细胞至少 50% 存活的存活率在 69% - 98% 之间，着床率在 16% - 30% 左右。早期卵裂阶段人类胚胎已成功在多种基于 DMSO、EG 等的溶液中玻璃化，存活率约 60% - 80%，且有多个妊娠 / 分娩案例。囊胚玻璃化常用 EG 和 DMSO 的混合物作为溶液，报道的总体存活率在 70% - 99% 之间，着床率在 20% - 50% 左右。
   • 不同方法的比较
     • 在一些比较研究中，发现玻璃化和缓慢降温在胚胎存活和着床率方面各有优劣。例如，在某些情况下玻璃化的卵裂阶段和囊胚阶段胚胎解冻后存活率较高，但在有经验的群体中，玻璃化并不比缓慢降温有更高的怀孕概率。
2. 卵母细胞冷冻保存的实践经验
   • 不同方法的影响
     • 在缓慢冷冻卵母细胞方面，提高蔗糖浓度（从 0.1M 到 0.3M）可以提高脱水率以及 MII 卵母细胞的存活率和受精率。改变 CPA 的平衡温度、冰晶成核和将胚胎浸入液氮的操作，以及用胆碱替代钠或直接向卵母细胞细胞质中注射蔗糖等方法都能提高卵母细胞的存活率。但缓慢冷却的卵母细胞相对于新鲜对照组发育较慢。在玻璃化卵母细胞方面，常用的玻璃化溶液由渗透性（2.7M EG 和 2.1M DMSO）和非渗透性 CPA（0.5M 蔗糖）组成，改进的玻璃化技术提高了玻璃化人类卵母细胞解冻后的存活率和受精率，与新鲜对照卵母细胞相当。

参考文献：Konc J, Kanyó K, Kriston R, Somoskői B, Cseh S. Cryopreservation of embryos and oocytes in human assisted reproduction. Biomed Res Int. 2014;2014:307268. doi: 10.1155/2014/307268. Epub 2014 Mar 23. PMID: 24779007; PMCID: PMC3980916.