新冠疫苗诱导的免疫性血小板减少和血栓形成的临床研究

截至2021年6月，全球已报告约1.75亿SARS-CoV-2感染和380万死于新冠病毒的案例，并建立了前所未有的快速临床疫苗开发计划。许多针对SARS-CoV-2的疫苗已获批并得到接种，其中接种最广泛的疫苗之一是ChAdOx1nCoV-19（阿斯利康），它通过使用非复制性黑猩猩腺病毒将刺突抗原传递给接种者。

ChAdOx1nCoV-19疫苗于2021年1月在英国推出，首先用于老年人，然后用于较年轻的人群。2021年3月，人们开始担心在ChAdOx1nCoV-19疫苗接种者中，血小板减少症相关的血栓形成的风险可能会增加。3月底，来自挪威、德国、奥地利和英国的研究小组报告了接种ChAdOx1nCoV-19疫苗后5至24天入院的人，这些患者在异常部位都出现了血栓形成、血小板减少、d-二聚体水平不成比例地升高和纤维蛋白原水平降低等情况，而这些患者中的大多数以前都是较为健康的年轻人。

来自牛津大学等机构的研究人员召集了一个血液学专家小组，设计了一项研究，来评估患者就诊、讨论治疗并根据观察结果制定共识性管理指南患者，和其他形式的免疫介导的血小板减少症和血栓形成的推断。在研究过程中，该组研究人员使用疫苗诱导的免疫性血小板减少症和血栓形成（VITT）作为术语，来承认其与肝素诱导的血小板减少症（HIT）的致病相似性。与HIT的临床和实验室相似性，得到了患者血清中可激活血小板的血小板因子4（PF4）的高滴度抗体的支持。由于这种不寻常且严重的血栓形成综合征以及ChAdOx1nCoV-19疫苗在人群早期推广的可能重要性，该项试验以最快的时间描述了英国报告的前220例确诊或潜在VITT病例。

VITT病例是根据以下五个标准进行定义的：

1. 接种SARS-CoV-2疫苗后5至30天出现症状

2. 存在血栓

3. 血小板减少症（血小板计数<150,000/mm）

4. d-二聚体水平大于4000纤维蛋白原当量单位（FEU）

5. 通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测到PF4抗体的存在

满足所有五个标准的人被认为具有明确的VITT，如图表1所示，不符合所有五个标准的人分别被判断为很可能、可能或不太可能发生VITT。

 

图表1：专家血液学小组所制定的疫苗诱导的免疫性血小板减少症和血栓形成（VITT）病例标准。

研究人员从初级保健从业人员或公共卫生机构获得了对所接种的SARS-CoV-2疫苗类型以及是第一剂还是第二剂的确认。在当地实验室进行的标准测试包括血小板计数、凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、通过克劳斯方法测量的纤维蛋白原水平和d-二聚体水平。凝血测试的正常范围是在当地实验室或试剂制造商使用的阈值确定的。d-二聚体水平的结果以FEU报告，正常水平低于500FEU（相当于<250ng/mL），许多实验室不会对20000FEU以上的d-二聚体水平进行定量，因此，当结果高于此水平时，记录为20000FEU。

在接受评估的294名患者中，有31名患者在VITT被确认为综合征后进行了回顾性鉴定。共有57名患者被归类为不太可能患有VITT，因为三个数据点缺失、未满足标准或两者兼有（50名患者）或因为患者症状可能存在其他原因（7名患者）。其他原因是腹主动脉瘤（3名患者）和转移性癌症（4名患者）导致的慢性播散性血管内凝血。在其余237名被认为疑似VITT的患者中，17名被归类为可能患有VITT；50人被归类为可能患有VITT。

直至研究结束时，英国已经有约1600万50岁及以上的人接种了首剂ChAdOx1nCoV-19，50岁以下的人共接种了800万剂首剂。因此，在50岁及以上的患者中，VITT的近似发生率至少为1:100000，而在较年轻组（<50岁）的患者中至少为1:50000。

 

图表2：220名确定或可能VITT患者的疾病部位。

未显示的疾病部位（血栓形成或出血）包括肠道和盆腔、视网膜、眼部和颈内静脉。

研究数据显示，72%的患者（所有血小板计数水平）在入院第1天以1g/kg体重的剂量使用了静脉注射免疫球蛋白。在11%的患者中，针对正在进行或复发的疾病给予了第二剂。试验过程中，共有17例脑静脉窦血栓形成、多部位血栓形成或两者兼有的重症患者进行了血浆置换，接受血浆置换并死亡的两名患者在就诊时都有广泛的颅内出血。26%的患者和50%的血小板计数低于30000/mm的患者使用了全身性糖皮质激素。制剂包括静脉注射甲泼尼龙、口服或静脉注射地塞米松和口服泼尼松龙。91%的患者接受了抗凝治疗，68%的患者使用了非肝素类抗凝剂，包括阿加曲班、磺达肝素、阿哌沙班和达比加群。50名患者(23%)在入院期间使用了肝素。

总体来说，在英国疫苗接种计划较为成功的背景下，VITT已成为一种罕见但具有破坏性的并发症，它经常影响年轻的、健康的疫苗接种者，并且与高死亡率呈现出了一定的相关性。该项研究表明了该病症通常在首次接种ChAdOx1nCoV-19后的5至30天内出现，同时，队列中85%的患者年龄小于60岁，尽管ChAdOx1nCoV-19疫苗接种在老年人中占主导地位。

50岁以下人群中VITT的发生率为1:50000，但实际发生率可能会更高，因为患者可能在确诊之前就出现了，有些病例可能没有被报告，有些病例可能会被错误分类。目前，关于50岁以下人群中年龄分段接种疫苗人数的数据仍然缺乏，因此无法确定特定年龄的发病率。尽管英国的疫苗接种计划优先考虑有基础疾病的人，但目前没有发现比背景人群预期频率更高的疾病。

血栓问题拥有显著的广泛性，它们通常同时涉及多个血管床以及静脉和动脉循环。尽管脑静脉血栓在临床表现中占主导地位，但深静脉血栓和肺栓塞、门静脉和内脏静脉血栓以及影响外周血管和心肌和脑动脉的动脉事件也很常见。脑静脉窦血栓形成通常累及许多静脉窦，血栓延伸到小静脉。血小板减少症患者静脉压升高的流出道阻塞可能是继发性出血的主要解释。在一些患者中，颅骨切除术或介入放射学进行血栓切除术以改善脑静脉引流是必要的。另外，血小板计数较低、纤维蛋白原水平较低和d-二聚体水平较高的更严重凝血激活的实验室证据都与死亡等结果直接相关。血小板计数低于每立方毫米30,000、脑静脉窦血栓形成和颅内出血的患者的死亡风险特别高。

目前，尚未找到治疗途径能够有效治疗VITT。静脉注射免疫球蛋白的基本原理是防止抗原-抗体复合物通过FcγII受体激活血小板，而这个基本原理是从自发HIT的方法推断出来的。由于患者数量少且非随机分配，研究人员目前还无法对抗凝剂的疗效进行比较，但肝素似乎对患者无害。

VITT的一系列临床和实验室特征似乎源于对疫苗成分产生反应的抗PF4抗体的产生，尽管尚不清楚涉及哪些成分，研究人员使用HITELISA检测抗PF4抗体，此前发现尽管这些检测在大多数VITT病例中呈阳性，但快速非ELISA检测通常呈阴性，目前正在计划用另一种ELISA方法重复测试，或许能够进一步帮助确定这是否是导致VITT的危险因素之一。

该项研究的一个潜在弱点是案例确定偏差，因为VITT是一种新的综合征，在没有充分了解病理生理学的情况下，包括为什么某些血管床更容易受到影响，以及在健康人群中接种疫苗后PF4抗体的真实发生率未知，可能包括错误定义情况等。在英国的一大群患者被定义了VITT的临床和实验室表型后，研究人员没有发现VITT的任何个体风险因素，但发现了出现严重血小板减少症、脑静脉窦血栓形成、颅内出血、严重凝血激活的实验室标志物或所有这些变量的患者死亡率增加。

综上所述，此次研究结论表明，VITT病例与第一次ChAdOx1nCoV-19疫苗接种呈相关性，并且主要影响60岁以下的患者。多部位血栓形成和动脉事件在试验中较为常见，除了抗凝治疗外，静脉注射免疫球蛋白是主要的治疗方法，而患有更严重疾病的患者可能会受益于血浆置换。

参考文献：
1. S Pavord, M Scully, Hunt BJ, Lester W, et al. Clinical Features of Vaccine-Induced Immune Thrombocytopenia and Thrombosis. N Engl J Med August 11, 2021.
2. Mathieu E, Ritchie H, Ortiz-Ospina E, et al. A global database of COVID-19 vaccinations. Nat Hum Behav 2021 May 10 (Epub ahead of print).
3. Ramasamy MN, Minassian AM, Ewer KJ, et al. Safety and immunogenicity of ChAdOx1 nCoV-19 vaccine administered in a prime-boost regimen in young and old adults (COV002): a single-blind, randomised, controlled, phase 2/3 trial. Lancet 2021;396:1979-1993.
4. Voysey M, Clemens SAC, Madhi SA, et al. Safety and efficacy of the ChAdOx1 nCoV-19 vaccine (AZD1222) against SARS-CoV-2: an interim analysis of four randomised controlled trials in Brazil, South Africa, and the UK. Lancet 2021;397:99-111.
5. Schultz NH, Sørvoll IH, Michelsen AE, et al. Thrombosis and thrombocytopenia after ChAdOx1 nCoV-19 vaccination. N Engl J Med 2021;384:2124-2130.